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原文传递一种基于花状SiO2构建的毒死蜱电化学适配体传感器

专利名称：	一种基于花状SiO2构建的毒死蜱电化学适配体传感器
摘要：	本发明涉及电化学适配体传感器的构建方法和检测方法，属于分析测试技术领域；特别是涉及一种基于花状氨基化介孔SiO2构建的毒死蜱电化学适配体传感器，包括电化学适配体传感器的制备步骤、使用该传感器测定毒死蜱的操作方法等；以DNA自身产生电流为识别信号，花状氨基化介孔SiO2通过纳米金负载大量适配体互补链以放大信号；构建的电化学适配体传感器，DNA放大策略简单，制备过程简捷，检测快速、特异性好、灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	周长利;刘建辉;韩春睿;刘汉彪;衣姜乐;田栋;夏方诠
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910716898.5
公开号：	CN110441369A
代理机构：	济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：	赵凤
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	250022山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.一种基于氨基化介孔SiO2构建的毒死蜱电化学适配体传感器，其特征在于，以DNA自身产生电流为识别信号，负载有大量适配体互补链的花状氨基化介孔二氧化硅复合物MSN-Au-cDNA放大信号；可快速、高灵敏特异性检测毒死蜱。 2.权利要求1所述的MSN-Au-cDNA复合物，其特征在于，制备方法为：（1）取200 μL、5 mg/mL花状氨基化介孔二氧化硅MSN于锥形瓶中加入12 mL金纳米粒子，搅拌12 h；在8500 rpm转速下离心5 min，超声分散在4 mL超纯水中，制得MSN-Au分散液；（２）将20 μL、10-7 mol/L毒死蜱互补链cDNA与180 μL 、MSN-Au分散液混合，震荡均匀，4℃下孵育12 h，得MSN-Au-cDNA复合物。 3.权利要求2所述花状氨基化介孔二氧化硅MSN，其特征在于，制备方法如下：（1）花状介孔二氧化硅合成：将0.5 g十六烷基溴化铵、15.0 mL超纯水和0.2 g尿素于三口烧瓶中搅拌均匀；向其中加入0.46 mL异丙醇和15.0 mL环己烷，继续搅拌均匀，用封口膜封闭；然后加入1.25 mL硅酸四乙酯，将混合液高速搅拌30 min以上；70℃水浴条件下，冷凝回流16 h，将产物用无水乙醇超声洗涤3-5遍，洗涤时加入2-4滴浓盐酸，将沉淀物分散在20 mL水中备用；（２）花状介孔二氧化硅的氨基化：将上述介孔SiO2纳米粒子用38 mL无水乙醇和2 mL超纯水超声分散，然后转入圆底烧瓶中搅拌均匀；向溶液中迅速的滴加200 μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，搅拌均匀，在N2保护下70℃反应12 h；将反应后的产物依次用无水乙醇和超纯水洗涤3次，超声分散在20 mL水中，制得MSN。 4.权利要求1所述的电化学适配体传感器，其特征在于，制备方法如下：（1）将处理好的玻碳电极GCE浸入含有2.5 mM HAuCl4、150 mM EDA和0.5 M H2SO4溶液中，在0.0V下恒电位沉积10 min，制得纳米金修饰玻碳电极Au NPs/GCE；（２）将10 μL、1.0 μM毒死蜱适配体滴涂到上述Au NPs/GCE表面，在4℃下孵化12 h，得Apt/Au NPs/GCE；（３）Apt/Au NPs/GCE以MCH封闭非特异性结合位点后，滴涂5μL MSN-Au-cDNA复合物，37℃下孵化1 h后用高纯水清洗，得MSN-Au-cDNA/Apt/Au NPs/GCE。 5.权利要求1-4任一项所述的电化学适配体传感器用于检测毒死蜱。 6.根据权利要求5所述的检测毒死蜱的方法，其特征在于，步骤如下：（1）在MSN-Au-cDNA/Apt/Au NPs/GCE表面，滴加不同浓度的毒死蜱标准溶液10 μL，37℃下孵化60 min后以水清洗；（２）继续在电极表面滴加10 mM的钼酸钠溶液5 μL，常温静置20 min；（３）将上述制得的电极浸入0.5 M的硫酸溶液，在0.0 ~ 0.5 V电位区间，进行方波伏安扫描；测定并计算与空白峰电流的差值；（４）将待测样品溶液代替毒死蜱标准溶液，按步骤（1）、（2）和（3）方法测定；以工作曲线法求算样品中毒死蜱的含量。
所属类别：	发明专利