原文传递
一种同时检测二价铅离子和二价铜离子的方法
| 专利名称： | 一种同时检测二价铅离子和二价铜离子的方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种简单的敏感荧光纳米探针，基于钳形酶链和环状催化剪切反应同时检测Pb2+和Cu2+。通过两个分裂的酶链DNA形成钳形酶链DNA。所述钳形酶链DNA可以通过与金纳米颗粒上的底物链组合形成Pb2+和Cu2+特异性DNA酶。当溶液中存在Pb2+或Cu2+，荧光团标记的底物链被切割并从金纳米颗粒的表面释放。同时，钳形酶链DNA也被释放用于下一轮环状催化剪切反应，导致Pb2+或Cu2+的荧光强度显著恢复。该方法灵敏度高，Pb2+检测限为80pM，Cu2+检出限为30pM。它还显示出同时检测Pb2+和Cu2+的高特异性。该方法具有用于环境和活细胞样品中金属离子的同时检测和成像的巨大潜力。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 重庆;50 |
| 申请人： | 重庆工商大学 |
| 发明人： | 云雯;吴虹;熊政委;刁晓琦;叶良钰 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-07-26T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-11-15T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910681785.6 |
| 公开号： | CN110455756A |
| 代理机构： | 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 沈振涛 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 404100重庆市南岸区学府大道19号 |
| 主权项： | 1.一种同时检测二价铅离子和二价铜离子的方法，包括如下步骤： 1)将分裂DNA酶链1和分裂DNA酶链2混合形成钳形酶链DNA，其中，分裂DNA酶链1序列为：AATCATCTCTGAAGTAGACCTAGCCTCTTTCTTTTTAAGAAAGAAC，分裂DNA酶链2序列为：GGTAAGCCTGGGCTAGGTCGCCGCCGTAGTG； 2)将所述钳形酶链DNA与底物链修饰的金纳米颗粒混合以形成特异性DNA酶结构，其中，底物链为：对应二价铅离子的FAM-CACTrAGGAAGAGATGATTAAAAAAAAAAAA-SH和对应二价铜离子的SH-AAAAAAAAAAAAAGCTTCTTTCTAATACGGCTTACC-Cy5(FAM(羧基荧光素)，Cy5(花青素))； 3)在步骤(2)所得溶液中加入适量待测样品溶液； 4)测定步骤(3)所得溶液荧光光谱，并用标准曲线法计算溶液中二价铅离子和二价铜离子浓度。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤1)中，将分裂DNA酶链1和分裂DNA酶链2在含有300mM NaCl的10mM Tris-HCl溶液(pH＝8)中孵育20分钟以形成钳形酶链DNA。 3.如前述权利要求之一所述的方法，其特征在于所述步骤3)中加入适量待测样品溶液后在室温下温育80分钟以进行环状切割。 4.如前述权利要求之一所述的方法，其特征在于步骤4)中，FAM的荧光光谱从495nm到600nm获得，激发波长为490nm；Cy5的荧光发射光谱从650nm扫描到750nm，激发波长为640nm。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
