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原文传递胰腺癌检测试剂、试剂盒、装置及应用

专利名称：	胰腺癌检测试剂、试剂盒、装置及应用
摘要：	本发明提供了一种胰腺癌检测试剂、试剂盒、装置及应用。该检测试剂包括如下任意两个或两个以上的分子标志物的抗体，其中，CD3、CD4、CD8及CD68属于A组，CD11b、CD14、CD33、CD45RO、CD57、CD66b、CD163、FoxP3、LAG3、PD1、PDL1、TIGIT、panCK及TIM3属于B组，至少一个分子标志物选自B组。本申请所提供的上述两种或两种以上的分子标志物的抗体来对胰腺癌进行检测，具有检测灵敏度高，特异性好的优势。因此，适合用于多重免疫组化的方法来检测胰腺癌患者肿瘤微环境是十分具有优势的，进而能够相对准确地预测该患者的是否有较长的生存期，即预后更好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	臻悦生物科技江苏有限公司
发明人：	张恒辉;陈衍辉;王雅婷;罗红丽
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910746150.X
公开号：	CN110456054A
代理机构：	北京康信知识产权代理有限责任公司
代理人：	路秀丽
分类号：	G01N33/574(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	225300江苏省泰州市医药城口泰路西侧、陆家路东侧G57幢73号二层东侧
主权项：	1.一种胰腺癌检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括如下任意两个或两个以上的分子标志物的抗体，其中， CD3、CD4、CD8及CD68属于A组，CD11b、CD14、CD33、CD45RO、CD57、CD66b、CD163、FoxP3、LAG3、PD1、PDL1、TIGIT、panCK及TIM3属于B组，至少一个所述分子标志物选自B组。 2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括如下所述分子标志物的抗体的组合中的任意一组或多组： (1)CD8和PD1；(2)CD68和CD163；(3)CD8和PDL1；(4)CD33和PD1；(5)CD8、CD163和PDL1；(6)CD8、CD68和PD1；(7)CD8、PD1和PDL1；(8)CD3、CD8、FoxP3和PD1及(8)CD8、PD1、CD68和PDL1；优选地，所述检测试剂选自任意五个或五个以上的所述分子标志物的抗体的组合；更优选地，所述检测试剂包括如下所述分子标志物的抗体的组合中的任意一个或多个组合：组合1：CD163、CD68、CD4、CD8、CD3；组合2：CD163、CD68、PDL1、CD8、PD1、CD57；组合3：FoxP3、CD45RO、CD4、CD8、CD3、PD1；组合4：LAG3、CD8、TIM3、PD1、TIGIT、PDL1；组合5：CD8、CD66b、CD11b、CD14、PD1、CD33；组合6：panCK、CD8、PDL1、CD3、PD1。 3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述分子标志物的抗体记为一抗，所述检测试剂还包括二抗，优选地，所述二抗选自辣根过氧化物酶、PV-6001、PV-6002或PV-8000。 4.根据权利要求3所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂还包括发光试剂，优选地，所述发光试剂选自带荧光基团的酪胺盐、520-FITC、540-AF517、570-Cy3、620-Cy3.5、650-Cy5或690-Cy5.5。 5.一种胰腺癌检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1至4中任一项所述的检测试剂。 6.胰腺癌分子标志物组合在制备检测胰腺癌的试剂盒中的应用，其中，所述胰腺癌分子标志物组合为如下任意两个或两个以上的分子标志物的组合，其中， CD3、CD4、CD8及CD68属于A组，CD11b、CD14、CD33、CD45RO、CD57、CD66b、CD163、FoxP3、LAG3、PD1、PDL1、TIGIT、panCK及TIM3属于B组，至少一个所述分子标志物选自B组。 7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用包括采用免疫组化的方法进行检测；优选所述免疫组化为多重免疫组化。 8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述胰腺癌分子标志物组合包括任意五个或五个以上的所述分子标志物的组合；优选地，所述胰腺癌分子标志物组合选自如下组合之一：组合1：CD163、CD68、CD4、CD8、CD3；组合2：CD163、CD68、PDL1、CD8、PD1、CD57；组合3：FoxP3、CD45RO、CD4、CD8、CD3、PD1；组合4：LAG3、CD8、TIM3、PD1、TIGIT、PDL1；组合5：CD8、CD66b、CD11b、CD14、PD1、CD33；组合6：panCK、CD8、PDL1、CD3、PD1。 9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述分子标志物的组合为CD8和PD1，所述应用为统计CD8+PD1-的细胞阳性率，优选判断所述CD8+PD1-的细胞阳性率是否大于等于第一阈值，更优选所述第一阈值≥2.5；优选地，所述分子标志物的组合为CD68和CD163，所述应用为统计CD68+CD163-的细胞阳性率，优选判断所述CD68+CD163-的细胞阳性率是否大于等于第二阈值，更优选所述第二阈值≥0.68；优选地，所述分子标志物的组合为CD8和CD163，所述应用为统计CD8+的细胞阳性率及CD163+的细胞阳性率，优选判断CD8+的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的比值是否大于等于第三阈值，更优选所述第三阈值≥2.41；优选地，所述分子标志物的组合为CD8和PDL1，所述应用为统计CD8+的细胞阳性率和PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值是否大于等于第四阈值，更优选所述第四阈值≥2.46；优选地，所述分子标志物的组合为CD33和PD1，所述应用为统计CD33+PD1+的细胞阳性率，优选判断所述CD33+PD1+的细胞阳性率的比值是否小于等于第五阈值，更优选所述第五阈值≤2.07；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、CD163和PDL1，所述应用为统计CD8+的细胞阳性率以及CD163+PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+的细胞阳性率/CD163+PDL1+的细胞阳性率的比值是否大于等于第六阈值，更优选所述第六阈值≥14.51；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、CD163和PD1，所述应用为统计CD8+PD1-的细胞阳性率及CD163+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+PD1-的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的比值是否大于等于第七阈值，更优选所述第七阈值≥2.5；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1和PDL1，所述应用为统计CD8+PD1-的细胞阳性率及PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+PD1-的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值是否大于等于第八阈值，更优选所述第八阈值≥4.3；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1和PDL1，所述应用为统计CD8+PD1+的细胞阳性率及PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+PD1+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值是否小于等于第九阈值，更优选所述第九阈值≤3.39；优选地，所述分子标志物的组合为CD3、CD8、FoxP3和PD1，所述应用为统计CD3+CD8+FoxP3-PD1-的细胞阳性率，优选判断所述CD3+CD8+FoxP3-PD1-的细胞阳性率是否大于等于第十阈值，更优选所述第十阈值≥8.75；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1、CD68和PDL1，所述应用为统计CD8+PD1+的细胞阳性率及CD68+PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述CD8+PD1+的细胞阳性率/CD68+PDL1+的细胞阳性率的比值是否大于等于第十一阈值，更优选所述第十一阈值≥1.85。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，在利用所述分子标志物的组合制备所述试剂盒的过程中，所述应用还包括统计PDL1+的细胞阳性率，优选判断所述PDL1+的细胞阳性率是否小于等于第十二阈值，更优选所述第十二阈值≤1.88。 11.一种胰腺癌检测装置，其特征在于，所述装置内置有胰腺癌分子标志物组合，所述胰腺癌分子标志物组合为如下任意两个或两个以上的分子标志物的组合，其中，CD3、CD4、CD8及CD68属于A组，CD11b、CD14、CD33、CD45RO、CD57、CD66b、CD163、FoxP3、LAG3、PD1、PDL1、TIGIT、panCK及TIM3属于B组，至少一个所述分子标志物选自B组。 12.根据权利要求11所述的装置，其特征在于，所述装置内置有参照指标，所述分子标志物的组合为CD8和PD1，所述参照指标为CD8+PD1-的参照细胞数量，优选所述CD8+PD1-的参照细胞数量≥2.5；优选地，所述分子标志物的组合为CD68和CD163，所述参照指标为CD68+CD163-的参照细胞数量，优选所述CD68+CD163-的参照细胞数量≥0.68；优选地，所述分子标志物的组合为CD8和CD163，所述参照指标为CD8+的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的第一参考比值，优选所述第一参考比值≥2.41；优选地，所述分子标志物的组合为CD8和PDL1，所述参照指标为CD8+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的第二参考比值，优选所述第二参考比值≥2.46；优选地，所述分子标志物的组合为CD33和PD1，所述参照指标为CD33+PD1+的细胞阳性率的第三参考比值，优选所述第三参考比值≤2.07；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、CD163和PDL1，所述参照指标为CD8+的细胞阳性率/CD163+PDL1+的细胞阳性率的第四参考比值，优选所述第四参考比值≥14.51；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、CD163和PD1，所述参照指标为CD8+PD1-的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的第五参考比值，优选所述第五参考比值≥2.5；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1和PDL1，所述参照指标为CD8+PD1-的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的第六参考比值，优选所述第六参考比值≥4.3；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1和PDL1，所述参照指标为CD8+PD1+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的第七参考比值，优选所述第七参考比值≤3.39；优选地，所述分子标志物的组合为CD3、CD8、FoxP3和PD1，所述参照指标为CD3+CD8+FoxP3-PD1-的参照细胞数量，更优选所述CD3+CD8+FoxP3-PD1-的参照细胞阳性率≥8.75；优选地，所述分子标志物的组合为CD8、PD1、CD68和PDL1，所述参照指标为CD8+PD1+的细胞阳性率/CD68+PDL1+的细胞阳性率的第八参考比值，优选所述第八参考比值≥1.85。 13.根据权利要求12所述的装置，其特征在于，所述参照指标还包括PDL1+的参照细胞数量，优选所述PDL1+的参照细胞数量≤1.88。 14.根据权利要求12中所述的装置，其特征在于，所述装置还包括：获取模块，所述获取模块用于获取待测样本免疫组化检测的结果指标，所述结果指标包括如下至少之一：CD8+PD1-的细胞阳性率、CD68+CD163-的细胞阳性率、CD8+的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的比值、CD8+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值、CD33+PD1+的细胞阳性率、CD8+的细胞阳性率/CD163+PDL1+的细胞阳性率的比值、CD8+PD1-的细胞阳性率/CD163+的细胞阳性率的比值、CD8+PD1-的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值、CD8+PD1+的细胞阳性率/PDL1+的细胞阳性率的比值、CD3+CD8+FoxP3-PD1-的细胞阳性率及CD8+PD1+的细胞阳性率/CD68+PDL1+的细胞阳性率的比值；比较模块，所述比较模块用于比较所述结果指标与所述参照指标。 15.根据权利要求14所述的装置，其特征在于，所述装置还包括输出模块，用于在所述结果指标与所述参照指标相符时，将所述结果指标输出为第一生存期，否则输出为第二生存期，所述第一生存期的长度≥所述第二生存期。 16.根据权利要求14所述的装置，其特征在于，所述结果指标还包括PDL1+的细胞阳性率。 17.根据权利要求14至16中任一项所述的装置，其特征在于，所述装置还包括检测模块，所述检测模块用于通过免疫组化方法利用所述胰腺癌分子标志物组合对所述待测样本进行所述免疫组化检测，得到所述结果指标。
所属类别：	发明专利