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原文传递一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型及其检测方法

专利名称：	一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型及其检测方法
摘要：	本发明公开了一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型及其检测方法，属于急性胰腺炎检测技术领域。本发明利用S100蛋白家族中的S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P建立急性胰腺炎严重程度预测模型，该预测模型对重症急性胰腺炎的诊断灵敏度92.30％，特异性84.70％，假阳性率15.30％，假阴性率7.70％。与目前临床使用的量表检测及影像学诊断相比，人为主观性降低，更为准确，而且具有定量检测的效果。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	辽宁;21
申请人：	大连医科大学附属第一医院
发明人：	尚东;尹沛源;刘建均;项红;宋慧一
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910848366.7
公开号：	CN110441438A
代理机构：	大连东方专利代理有限责任公司
代理人：	周媛媛;李馨
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	116011辽宁省大连市西岗区中山路222号
主权项：	1.一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型，其特征在于，所述急性胰腺炎严重程度预测模型为Y＝ex，其中X＝-3.102+(-5.98E-04)S100A11+(3.33E-06)S100A12+(6.28E-05)S100A6+(2.46E-05)S100A8+(-2.54E-05)S100A9+(1.22E-04)S100P，所述S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P分别为待检测样本血清中S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P蛋白的浓度，当Y值>0.14489时，提示为高重症胰腺炎发病风险。 2.根据权利要求1所述的预测模型的检测方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)采集血清，依次加入裂解缓冲液和Tris-HCl缓冲液，所述血清、裂解缓冲液和Tris-HCl缓冲液的体积比为1:20:5，恒温孵育； (2)加入碘乙酰胺，避光恒温孵育； (3)胰酶消化得到肽段，所得肽段加入10μL pH 2-3的三氟乙酸酸化后，以C18SPE柱除盐，然后将所得肽段冻干； (4)步骤(3)得到的样品复溶于复溶溶剂，采用DIA定量蛋白质组学分析方法检测血清中S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P蛋白的浓度，并通过模型Y＝ex，其中X＝-3.102+(-5.98E-04)S100A11+(3.33E-06)S100A12+(6.28E-05)S100A6+(2.46E-05)S100A8+(-2.54E-05)S100A9+(1.22E-04)S100P计算来进行急性胰腺炎严重程度的预测，当Y值>0.14489时，提示为高重症胰腺炎发病风险。 3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中的裂解缓冲液为0.1M碳酸氢钠，6M尿素以及2M硫脲。 4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中Tris-HCl缓冲液的PH值为8.5。 5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中孵育条件为33℃下恒温孵育45分钟。 6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中碘乙酰胺的浓度为40mM，碘乙酰胺与血清的体积比为1:4，孵育温度为25℃，孵育时间为1h。 7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中胰酶的用量为100μL，浓度为0.01ug/μL，胰酶消化条件为33℃下消化16h。 8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中的复溶溶剂为含有0.1％甲酸和2％乙腈的水溶液，所述复溶溶剂的体积为20μL。 9.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)DIA定量蛋白质组学分析方法参数设置具体为：样品分离采用120分钟液相色谱梯度，其中，流动相：A:体积比为0.1％的甲酸/水；B:体积比为0.1％的甲酸/水/乙腈，其中甲酸：水：乙腈的体积比为0.1：19.9：80；梯度：0～6min,3％-8％B，6～108min,8％-30％B,108～116min,30％-90％B，116～120min,90％-90％B；流速：300nL/min，进样量为0.4μg；质谱质核比范围设定为400to1000m/z，一级质谱分辨率设定为60000，二级质谱分辨率设定为30000。
所属类别：	发明专利