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原文传递沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法

专利名称：	沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法
摘要：	本发明公开了沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法，采用液相色谱法进行化合物I的定性检测，所述化合物I为本发明首次发现并成功从沙棘提取物中分离提纯，本发明检测方法对所述化合物I具有良好的杂质检出能力，对沙棘提取物中化合物I进行检测和含量、浓度确定。本发明化合物I具有α‑葡萄糖苷酶活性抑制效果，本发明的提出对该化合物的进一步研究和沙棘的综合开发利用提供方便。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	青海;63
申请人：	中国科学院西北高原生物研究所
发明人：	胡娜;周浩楠;王洪伦;董琦
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910543652.2
公开号：	CN110441410A
代理机构：	成都华风专利事务所(普通合伙)
代理人：	杜朗宇
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	810008青海省西宁市西关大街59号
主权项：	1.沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法，其特征在于，采用液相色谱法进行化合物的定性检测，包括以下色谱条件：色谱柱：C18色谱柱，优选为规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20％～30％A，80％～70％的B。 2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述化合物包括式I所示化合物 3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，还包括以下条件中的至少一种：检测波长：203±10nm；柱温为：30±5℃。 4.根据权利要求2中任一权利要求所述方法，其特征在于，所述沙棘提取物通过以下方法制备得到： (1)将沙棘浸膏上硅胶柱，以石油醚以及不同体积比例混合的石油醚和乙酸乙酯的混合液为流动相进行洗脱，其中石油醚与乙酸乙酯混合比例为(9～1)：(1～9)，收集洗脱液； (2)将步骤(1)所得洗脱液依次进行液相正相液相色谱分析、正相色谱制备、反相液相色谱分析和反相色谱制备，最后进行液相色谱分析纯度，获得所述式I化合物。 5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤(2)包括以下内容：正相液相色谱分析条件包括：色谱柱：亲水HILIC色谱柱；优选为规格为4.6mm250mm，5μm；流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2％～4％的A，98％～96％的B；进一步的，还包括以下色谱分析条件中的至少一种：检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；流速：1±0.5mL/min；进样量：10±5μL；所述正相色谱制备条件包括：色谱柱：HILIC色谱柱；优选为规格为20mm250mm，5μm；流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2％～4％A，98％～96％B；进一步地，还包括以下色谱制备条件中的至少一种：检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；流速：19±2mL/min；进样量：1±0.5mL；收集式I所示化合物对应的组分，将所得组分进行反相液相色谱分析、反相色谱制备，获得所述化合物。 6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，进行液相色谱分析、反相色谱制备包括以下内容：反相液相色谱分析包括以下色谱条件：色谱柱：C18色谱柱，优选为规格为4.6mm250mm，5μm；流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20％～30％A，80％～70％的B；进一步地，还包括一下色谱分析条件中的至少一种：检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；流速：1±0.5mL/min；反相制备色谱条件包括：色谱柱：C18色谱柱，优选规格为21.2mm250mm，5μm；流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20％～30％A，80％～70％的B；进一步地，还包括以下制备色谱条件中的至少一种：检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；流速：21±2mL/min；将制备后的溶液浓缩，再进行相同条件的液相分析，判断所得组分的纯度；若纯度大于98％，获得目标化合物；若纯度小于98％，则再进行色谱制备。 7.根据权利要求1-6中任一权利要求所述方法，其特征在于，步骤(1)依次采用的石油醚与乙酸乙酯混合比例为9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8，1:9。 8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，步骤(1)洗脱过程中通过薄层色谱分析法确定石油醚:乙酸乙酯为7:3时的馏分为所述化合物含量最高的馏分。 9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，步骤(2)正相色谱制备后，收集保留时间为14～19min对应的组分，进行下一步分析。 10.根据权利要求1-6中任一权利要求所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述沙棘浸膏采用乙醇对沙棘进行提取得到；进一步地，采用体积浓度为95％乙醇进行提取；更进一步地；将沙棘果渣与乙醇按照料液比为1：(10～30)kg/L混合在70～80℃下提取，每次提取1.5～2.5h，提取3～4次，合并提取液除去溶剂得到浸膏。
所属类别：	发明专利