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一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法
| 专利名称： | 一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法 |
| 摘要： | 本发明公开一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，包括以下操作步骤：(1)在白菜播种两周后，接种根肿菌；(2)接种根肿菌后2天内控水，之后恢复正常管理及时浇水并补充营养元素；(3)接菌三周后取白菜根制作石蜡切片，先用苯胺蓝染色2‑4min，然后依次用ddH2O、70％的酒精、100％酒精清洗干净，再用尼罗红染色50‑70s，最后用100％酒精清洗30秒，晾干，在荧光显微镜紫外激发光下观察。本发明提供的一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，操作简单，绿色环保，成本低，可特异的将白菜根部细胞的细胞壁染成红色，淀粉粒染成亮绿色或者蓝绿色，而根肿菌被染成蓝色。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 辽宁;21 |
| 申请人： | 沈阳农业大学 |
| 发明人： | 庞文星;朴钟云;李晓楠;战宗祥;王钰;郭嫱 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-08-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-11-22T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910808931.7 |
| 公开号： | CN110487615A |
| 代理机构： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 赵红霞 |
| 分类号： | G01N1/30(2006.01);G;G01;G01N;G01N1 |
| 申请人地址： | 110866 辽宁省沈阳市沈河区东陵路120号 |
| 主权项： | 1.一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，其特征在于，包括以下操作步骤： (1)在白菜播种两周后，接种根肿菌； (2)接种根肿菌后2天内控水，之后恢复正常管理及时浇水并补充营养元素； (3)接菌三周后取白菜根制作石蜡切片，先用苯胺蓝染色2-4min，然后依次用ddH2O、70％的酒精、100％酒精清洗干净，再用尼罗红染色50-70s，最后用100％酒精清洗30秒，晾干，在荧光显微镜紫外激发光下观察。 2.根据权利要求1所述的一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，其特征在于，上述步骤(1)中，白菜播种的基质在使用前经过灭菌处理。 3.根据权利要求1所述的一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，其特征在于，上述步骤(1)中，接种根肿菌时，菌浓度为1×107个/ml，每棵白菜接种量为1ml。 4.根据权利要求1所述的一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，其特征在于，上述步骤(3)中，石蜡切片的制作步骤包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和粘片、脱蜡。 5.根据权利要求1所述的一种鉴定十子花科植物根肿病的复合荧光染色方法，其特征在于，上述步骤(3)中，第一次清洗时，ddH2O的清洗时间为1-5min，70％酒精的清洗时间为1-3min，100％酒精的清洗时间为1min。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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