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原文传递一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法

专利名称：	一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法
摘要：	本发明申请属于电泳技术领域，具体公开了一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，包括以下步骤：(1)将新鲜采摘的润楠属植物叶片，用自来水洗净后，再用超纯水漂洗2‑3次；将叶片上水沥干；(2)取步骤(1)中润楠属植物叶片，提取润楠属植物叶片中的过氧化物酶备用；(3)取步骤(2)中的过氧化物酶采用单向电泳快速分离润楠属植物叶过氧化物酶；(4)将步骤(3)中分离的过氧化物酶采用联苯胺法快速显色，显色完成后，在扫描仪中的透射稿模式快速扫描染色后的凝胶。本发明主要用于鉴定樟科润楠属植物，解决了现有技术检测润楠属植物的分类周期性长、可行性差以致对鉴定造成不便的问题。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	湖北民族大学
发明人：	肖强;周秀梅;王楠;吴秋花
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910607957.5
公开号：	CN110186918A
代理机构：	重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	陈炳萍
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	445000 湖北省恩施土家族苗族自治州恩施市学院路39号
主权项：	1.一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)将新鲜采摘的润楠属植物叶片，用自来水洗净后，再用超纯水漂洗2-3次；将叶片上水沥干； (2)取步骤(1)中润楠属植物叶片，提取润楠属植物叶片中的过氧化物酶备用； (3)取步骤(2)中的过氧化物酶采用单向电泳快速分离润楠属植物叶过氧化物酶； (4)将步骤(3)中提取的过氧化物酶采用联苯胺法快速显色，显色完成后，在扫描仪中的透射稿模式快速扫描染色后的凝胶。 2.根据权利要求1所述的一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，其特征在于，步骤(2)中提取润楠属植物叶片中的过氧化物酶的方法采用冰浴研磨法。 3.根据权利要求2所述的一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，其特征在于，冰浴研磨法包括以下步骤：先将植物叶片剪碎，在天平上称重，叶鲜重：提取液体积按1:8比例加入50mmol/L、pH为7.8的PBS样品提取液，冰浴研磨，在4℃条件下，12000rpm离心20min，所得上清液按照体积比为1：1加入质量分数为40％蔗糖，所得溶液按照8:1加入0.5％的溴酚蓝，贮存4℃冰箱备用。 4.根据权利要求3所述的一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，其特征在于，单向电泳快速分离法包括以下步骤：(1)采用垂直电泳槽进行试验，利用循环水浴系统冷却电泳仪进行垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳，制好模具后，将在4℃冰箱冷却的试剂调配成分离胶浓度为7.5％，pH为8.8的丙烯酰胺分离胶灌注至梳子下端2.5cm处，用超纯水或者异丙醇液封，凝胶半小时以上； (2)弃去分离胶上的超纯水或异丙醇，4℃冰箱冷却的试剂调配成浓度为5％、pH为6.8的丙烯酰胺浓缩胶，插入长城齿梳子，凝胶半小时以上； (3)用甘氨酸电极缓冲液在180V(10V/cm)恒压电泳40min，前沿指示剂到达分离胶后变换电压为310V，恒压电泳7h后，停止电泳。 5.根据权利要求4所述的一种快速鉴定樟科润楠属植物的方法，其特征在于，甘氨酸电极缓冲液含1.44％甘氨酸和0.3％Tris。
所属类别：	发明专利