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原文传递一种芍药属植物根尖染色体制片的方法

专利名称：	一种芍药属植物根尖染色体制片的方法
摘要：	本发明涉及植物的染色体制片方法，具体涉及一种芍药属植物根尖染色体制片的方法，与现有技术的区别在于，根尖取材范围扩大到芍药组和牡丹组内植物，解离步骤是将固定后的材料放入无水乙醇与37％盐酸体积比为3:1的解离液中，室温下解离；还增加蒸馏水中低渗步骤。本发明取材于大田中的芍药和牡丹实生苗，特殊的解离步骤，一方面降低了实验所需的条件，更便于实验进行；另一方面适当地提升了盐酸浓度，不仅降低了细胞壁和细胞质对制片结果的影响，同时也防止在高温酸性条件下，染色体的断裂分解；解离后低渗使得染色体分散良好，计数方便，背景干净。
专利类型：	发明专利
申请人：	沈阳农业大学
发明人：	孙晓梅;辛如洁;杨宏光;李雪婷;宋莉莉;刘雪婷
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T13:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010034994.4
公开号：	CN111175102A
代理机构：	北京君泊知识产权代理有限公司
代理人：	李丹
分类号：	G01N1/28;G01N1/30;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/28;G01N1/30
申请人地址：	110866 辽宁省沈阳市沈河区东陵路120号
主权项：	1.一种芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)取材：取大田中生长健壮的芍药属植物实生苗的白色根尖，置于盛有清水的容器中，作为制片的材料备用； (2)预处理：将制片的材料清洗干净，放入对二氯苯饱和水溶液中，在0～4℃预处理3.5h； (3)固定：将预处理后的材料用蒸馏水漂洗3次，吸干水分，置于新配制的卡诺固定液中，在0～4℃固定22～24h； (4)解离：将固定后的材料用蒸馏水漂洗3次，吸干水分，放入无水乙醇与37％盐酸体积比为3:1的解离液中，室温下解离6～8min； (5)低渗：将解离后的材料用蒸馏水漂洗3次，吸干水分，再放入蒸馏水中低渗20～30min； (6)染色：将低渗后的材料置于载玻片上，取根尖前端2mm呈现出乳白色的部分，解剖刀将取下的根尖沿纵向切割成两部分，用吸水纸吸干根尖周围的水分，滴入1滴改良型卡宝品红染色剂，染色6～8min； (7)压片； (8)镜检。 2.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，步骤(1)所述的芍药属植物包括芍药组和牡丹组内植物。 3.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，步骤(1)所述的取材是在上午9点到11点挖取实生苗。 4.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，步骤(1)所述的白色根尖为1～1.5cm。 5.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，取材后到预处理步骤不超过2h。 6.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，步骤(7)所述的压片步骤具体为：盖上盖玻片，吸除材料周围多余的染色剂，用带橡皮头的铅笔轻压盖玻片，使组织成为一薄层，用铅笔的橡皮头在盖玻片上轻轻敲击，使细胞分散。 7.根据权利要求1所述的芍药属植物根尖染色体制片的方法，其特征在于，步骤(8)所述的镜检步骤具体为：将步骤(7)得到的压片置于Motic显微镜下观察，选择染色体分散、清晰的细胞进行显微照相，以便进行核型分析。
所属类别：	发明专利