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原文传递基于近红外二区荧光成像用于侧向流免疫检测的试条、检测设备及非诊断目的的检测方法

专利名称：	基于近红外二区荧光成像用于侧向流免疫检测的试条、检测设备及非诊断目的的检测方法
摘要：	本发明提供近红外二区荧光成像在非诊断目的的侧向流免疫检测中的应用，即在侧向流免疫检测试条中使用近红外二区荧光探针提供发射光信号，并使用近红外二区荧光检测仪检测所述发射光信号。本发明还提供基于近红外二区荧光成像的侧向流免疫检测试条、检测设备及非诊断目的的检测方法。本发明所述的近红外二区荧光成像在侧向流免疫检测中的应用具有重要意义，本发明提供的基于近红外二区荧光成像的侧向流免疫检测试条检测灵敏度更高，配合本发明所述的专用检测设备，可使本发明所述的非诊断目的的检测方法信号具有更高的穿透性、本底更低，具有广泛的应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	莎穆(上海)生物科技有限公司
发明人：	陈小元;田蕊;朱守俊
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910825945.X
公开号：	CN110455766A
代理机构：	北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘俊玲
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	200336上海市长宁区剑河路2001弄13号402
主权项：	1.近红外二区荧光成像在非诊断目的的侧向流免疫检测中的应用，其特征在于，在侧向流免疫检测试条中使用近红外二区荧光探针提供发射光信号，并使用近红外二区荧光检测仪检测所述发射光信号。 2.一种利用近红外二区荧光进行非诊断目的的侧向流免疫层析的方法，包括：利用近红外二区荧光物质标记待测抗原或抗体；在试条的层析区域包被与所述待测抗原或抗体识别位点不同的抗原或抗体；待测样品与被标记的待测抗原或抗体在所述试条上混合后扩散通过所述层析区域；然后激发所述试条上的近红外二区荧光物质发射荧光信号并加以捕捉成像；根据成像结果判断待测样品中是否含有与所述待测抗原或抗体可发生特异性反应的成分。 3.一种利用近红外二区荧光进行非诊断目的的侧向流免疫层析的方法，包括：利用近红外二区荧光物质标记抗原A或抗体A；在试条的层析区域沿层析方向间隔地设有检测线和质控线，所述的检测线处包被有与抗原A或抗体A识别位点不同的抗原B或抗体B，所述的质控线处包被有定标用抗原C或抗体C；待测样品与抗原A或抗体A在所述试条上混合形成待测复合物，所述待测样品中如含有可与抗原A或抗体A发生特异性反应的成分，则所述待测复合物中会因特异性反应形成被标记的抗原抗体复合物；所述待测复合物扩散至所述检测线时，所述的被标记的抗原抗体复合物被检测线处包被的特异性的抗原B或抗体B捕获并固定；待测样品层析越过所述检测线到达所述质控线时，被标记的抗原A或抗体A被所述质控线处的抗原C或抗体C捕获并固定；激发所述试条上的近红外二区荧光物质发射荧光信号并加以捕捉成像；根据成像结果判断待测样品中是否含有与所述待测抗原或抗体可发生特异性反应的成分。 4.权利要求2-3任意一项所述的方法，其特征在于：所述的近红外二区荧光物质选自近红外二区量子点或近红外二区荧光染料中的任意一种。 5.权利要求4所述的方法，其特征在于:所述的近红外二区量子点包括PbS量子点或Ag2S量子点中的任意一种；所述的近红外二区荧光染料包括花青染料或“给体-受体-供体”染料中的任意一种。 6.权利要求2或3任意一项所述的方法，其特征在于：所述的激发是采用波长大于或等于800nm的激发光照射所述层析区域。 7.一种侧向流免疫层析试条，它包括底衬板，以及所述底衬板上沿底衬板长度依次设置的样品垫、标记物垫、层析膜及吸水垫，所述的层析膜上间隔地设有检测线与质控线；其特征在于：所述的标记物垫上固定有近红外二区荧光探针，所述的近红外二区荧光探针是近红外二区荧光物质标记的抗原A或抗体A；所述的检测线处包被有与抗原A或抗体A识别位点不同的抗原B或抗体B；所述的质控线处包被有定标用抗原C或抗体C。 8.权利要求7所述的试条，其特征在于：所述近红外二区荧光物质选自近红外二区量子点或近红外二区荧光染料中的任意一种；所述的近红外二区量子点更优选PbS量子点或Ag2S量子点中的任意一种；所述的近红外二区荧光染料更优选包括花青染料或“给体-受体-供体”染料中的任意一种。 9.制备权利要求7所述试条的方法，包括： 1)制备近红外二区荧光物质标记抗原A或抗体A的荧光探针； 2)将1)所述的荧光探针的稀释液加载于玻璃纤维垫上，进一步冻干制得标记垫； 3)在层析膜上包被与1)所述的抗原A或抗体A识别位点不同的抗原B或抗体B作为检测线，同时包被定标用抗原C或抗体C作为质控线，烘干后得到包被的层析膜； 4)按照常规方法将样品垫、2)所得的标记垫、3)所得的包被的层析膜、吸收垫组合固定在底衬板上，得到所述的试条。 10.权利要求9所述的方法，其特征在于：1)所述的荧光探针制备方法具体包括：将近红外二区荧光物质加入抗原A或抗体A和缓冲液中，然后逐滴加入活化剂(优选EDC)，控制抗原A或抗体A:近红外二区荧光物质:活化剂的摩尔比为20:1:10000，室温混匀3～5h，之后纯化得到近红外二区荧光物质标记的抗原A或抗体A(标记物)。 11.一种利用近红外二区荧光进行非诊断目的的侧向流免疫层析的专用检测设备，其特征在于，至少包括框架、试条传送及固定装置、荧光激发及成像装置；所述的框架用于将所述的试条传送及固定装置和所述的荧光激发及成像装置集成为一体；所述的试条传送及固定装置用于将权利要求7所述的侧向流免疫层析试条输送至所述荧光激发及成像装置的观测位置并加以固定；所述的荧光激发及成像装置用于向被传送并固定的所述侧向流免疫层析试条发出红外激发光并捕捉由此产生的近红外二区荧光以成像；所述的荧光激发与成像装置至少包括红外光源、近红外相机和二向色镜；所述的红外光源的发光方向与所述近红外相机的感光方向相互垂直且同处于一个光路平面内；所述的二向色镜设置在所述光路平面内且位于所述发光方向与所述感光方向的交点；所述的光路平面与所述侧向流免疫层析试条被固定的平面相垂直，且所述的发光方向或感光方向与所述侧向流免疫层析试条上的层析膜处于同一直线上。 12.一种利用近红外二区荧光进行非诊断目的的侧向流免疫层析的专用检测设备，其特征在于，所述的专用检测设备包括框架、试条传送及固定装置、荧光激发及成像装置；所述的框架包括底板及底板上自下而上层叠设置的试条传送舱和检测设备舱；所述的试条传送舱任意一侧面的中部设有向内凹陷的插槽作为试条传送及固定装置，插槽内侧壁设有一对滑道，用于将权利要求7所述的试条通过试条固定板从插槽入口处插入并沿滑道滑动，由此实现试条从所述试条传送舱的进出，所述的滑道远端设有限位装置；所述的荧光激发与成像装置设置在所述的检测设备舱内，至少包括红外光源、近红外相机和二向色镜；所述的红外光源的发光方向设置为水平，所述近红外相机的感光方向为竖直向上，所述发光方向与所述感光方向交点处设置所述的二向色镜；所述滑道的限位装置使所述试条固定板进入所述试条传送舱后试条上的层析膜位于所述二向色镜的正下方，并与所述近红外相机、二向色镜处于同一条垂直线上。 13.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述光源与所述的二向色镜之间进一步沿光路方向设有短波通滤光片。 14.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述的二向色镜与所述的近红外相机之间进一步沿光路方向依次设置长波通滤光片、聚光镜和准直镜。 15.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述的专用检测设备还设有带电源组件的显示屏，所述的显示屏通过数据线与所述的近红外相机电连接，用于接收和显示来自所述近红外相机的荧光成像结果。 16.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述的荧光激发与成像装置还设有无线传输模块，用于通过无线方式向外部接收端传输荧光成像结果，所述的外部接收端可以是可移动终端，例如手机、移动PC等等。 17.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述的光源为可发射800nm波长近红外光的LED光源。 18.权利要求11或12任意一项所述的专用检测设备，其特征在于：所述的近红外相机为敏感波段在1000-1700纳米的近红外相机；最优选敏感波段在1000-1700纳米的铟镓砷相机。
所属类别：	发明专利