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原文传递采用荧光技术检测多种待检测物质的方法及荧光检测产品

专利名称：	采用荧光技术检测多种待检测物质的方法及荧光检测产品
摘要：	本发明公开了一种采用荧光技术检测多种待检测物质的方法及荧光检测产品。其中，待检测物质包括第一待检测物质和第二待检测物质，该方法包括以下步骤：S1，获取可与第一待检测物质发生配对反应的第一配体和第二配体，获取可与第二待检测物质发生配对反应的第三配体和第四配体；S2，将量子点或量子点微球标记的第一配体和时间分辨微球标记的第三配体与检测样本接触后再与第二配体和第四配体进行接触并分别进行反应；S3，单激发光源同时照射激发第二配体和第四配体所在的位置，量子点或量子点微球在有激发光下进行第一次荧光数据读取，时间分辨微球在无激发光下进行第二次荧光数据读取，实现了同时检测多种蛋白的可能，可操作性强，稳定性好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京纳晶生物科技有限公司
发明人：	曹少伟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910900829.X
公开号：	CN110488024A
代理机构：	北京康信知识产权代理有限责任公司
代理人：	梁文惠
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100094 北京市海淀区北清路103号超然时代2号楼2层2-2
主权项：	1.一种采用荧光技术检测多种待检测物质的方法，其特征在于，所述待检测物质包括第一待检测物质和第二待检测物质，所述方法包括以下步骤： S1，获取可与所述第一待检测物质发生配对反应的第一配体和第二配体，且所述第一配体和所述第二配体与所述第一待检测物质的配对位点不同；获取可与所述第二待检测物质发生配对反应的第三配体和第四配体，且所述第三配体和所述第四配体与所述第二待检测物质的配对位点不同，对所述第一配体进行量子点或量子点微球标记得到量子点或量子点微球标记的第一配体，对所述第三配体进行时间分辨微球标记得到时间分辨微球标记的第三配体，且所述量子点或量子点微球和所述时间分辨微球的荧光发射波长有重合；将所述第二配体和所述第四配体固定在载体上； S2，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体与检测样本接触后再与所述第二配体和所述第四配体进行接触并分别进行反应； S3，单激发光源同时照射激发所述第二配体和所述第四配体所在的位置，所述量子点或量子点微球在有激发光下进行第一次荧光数据读取，所述时间分辨微球在无激发光下进行第二次荧光数据读取，所述第一次荧光数据读取和所述第二次荧光数据读取的时间间隔为小于10秒。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中，获取能够与所述第一配体和所述第三配体结合的第五配体，将所述第五配体固定在所述载体上；所述S2中，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体与检测样本接触后再与所述第五配体进行接触，在所述S3中同时对所述第五配体所在的位置进行检测并进行荧光数据读取。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述量子点或量子点微球的激发光波长在300～480nm，荧光发射波长在590～630nm；所述时间分辨微球的激发光波长在300～480nm，荧光发射波长在590～630nm；所述第一次荧光数据读取和所述第二次荧光数据读取的时间间隔为100～500μs；优选的，在同一激发波长下，所述量子点或量子点微球和所述时间分辨微球的荧光发射波长差值为0～30nm，更优选差值为0～20nm。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述量子点或量子点微球的激发光波长为365nm，荧光发射波长为610nm；所述时间分辨微球的激发光波长为365nm，荧光发射波长为610nm；优选所述时间分辨微球的荧光物质为铕离子。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中，所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合使用，所述S1中，所述第二配体和所述第四配体混合后固定在所述载体上。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载体选自硝酸纤维素膜、聚酯膜、聚偏二氟乙烯膜、经壳聚糖进行表面处理的玻璃基片或高聚物基片；优选的，所述高聚物基片的材质选自由纸纤维、玻璃纤维或聚苯乙烯组成的组中的一种或多种。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S1包括，提供微孔板，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后固化在所述微孔板的每一微孔内；所述步骤S2包括，将所述检测样本加入到所述微孔内溶解固化的所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体，然后再与所述第二配体和所述第四配体进行接触。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S1包括，提供具有吸取液体功能的管状物，所述管状物具有储存固体或液体的储存件，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后置于所述储存件内；所述步骤S2包括，使用所述管状物吸取所述检测样本，使所述检测样本与所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体接触以形成混合溶液，然后将所述混合溶液与所述第二配体和所述第四配体进行接触。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述管状物为移液器或塑料吸管；优选地，所述管状物为移液器，所述储存件为移液器的枪头，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后固化于所述枪头内部；优选地，所述管状物为塑料吸管，所述储存件为塑料吸管的管腔，将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后制作成固体荧光球置于所述管腔内，或将所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后以液态储存于所述管腔内。 10.一种荧光检测产品，其特征在于，包括：量子点或量子点微球标记的第一配体；时间分辨微球标记的第三配体；第一载体，用于固定所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体，所述第一配体可与第一待检测物质发生配对反应，所述第三配体可与第二待检测物质发生配对反应；第二配体，可与所述第一待检测物质发生配对反应；第四配体，可与所述第二待检测物质发生配对反应；以及第二载体，用于固定可与第一待检测物质发生配对反应的所述第二配体和可与第二待检测物质发生配对反应的所述第四配体，其中，所述第一配体和所述第二配体与所述第一待检测物质的配对位点不同，所述第三配体和所述第四配体与所述第二待检测物质的配对位点不同，所述量子点和所述时间分辨微球的荧光发射波长有重合。 11.根据权利要求10所述的荧光检测产品，其特征在于，所述第一载体和所述第二载体为一体设置的荧光检测试纸，所述荧光检测试纸包括支撑板和设置在所述支撑板上依次连接排布的上样垫、荧光释放垫、反应膜和吸样垫；其中，所述荧光释放垫含有所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体；所述反应膜上设置有检测线，所述检测线为包被在所述反应膜上的所述第二配体和所述第四配体形成的线状印迹；所述荧光检测试纸还包括与所述检测线平行设置的质控线，所述质控线为包被在所述反应膜上的能够与所述第一配体和所述第三配体结合的第五配体形成的线状印迹；优选的，所述荧光检测试纸包括采用相同方法设置的针对多种待检测物质的多条检测线。 12.根据权利要求10所述的荧光检测产品，其特征在于，所述第一载体为微孔板，所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合后固化在所述微孔板的每一微孔内，优选所述微孔板包括采用相同方法设置的针对多种待检测物质的多个微孔；或所述第一载体为具有吸取液体功能的管状物，所述管状物具有储存固体或液体的储存件，所述储存件内储存有所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体的混合物；优选的，所述管状物为移液器，所述储存件为移液器的枪头，所述枪头的内部固化有所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体的混合物；优选的，所述管状物为塑料吸管，所述储存件为塑料吸管的管腔，所述管腔内含有所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合制作成的固体荧光球，或所述量子点或量子点微球标记的第一配体和所述时间分辨微球标记的第三配体混合液体。 13.根据权利要求10所述的荧光检测产品，其特征在于，所述第二载体上还固定有能够与所述第一配体和所述第三配体结合的第五配体；优选的，所述第二配体和所述第四配体形成检测线，所述第五配体形成与所述检测线平行设置的质控线。 14.根据权利要求10所述的荧光检测产品，其特征在于，所述量子点或量子点微球的激发光波长在300～480nm，荧光发射波长在590～630nm；所述时间分辨微球的激发光波长在300～480nm，荧光发射波长在590～630nm；优选地，所述量子点或量子点微球和所述时间分辨微球的激发光波长为365nm，所述量子点或量子点微球和所述时间分辨微球的荧光发射波长为610nm。 15.一种采用荧光检测待检测物质的方法，其特征在于，包括采用如权利要求10至14中任一项所述的荧光检测产品进行检测。
所属类别：	发明专利