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原文传递一种彗星实验中的换液方法

专利名称：	一种彗星实验中的换液方法
摘要：	本发明涉及分子生物学技术领域，尤其是一种彗星实验中的换液方法，包括以下步骤：S1、第一层胶的制备，将做好标记的载玻片放在50℃的干浴锅上1‑3分钟后，取煮沸后冷却的试剂M 200ul滴在同样预热的载玻片的磨砂面，迅速盖上干净的盖玻片，制成滴片；S2、之后再制备第二层胶，从4℃环境中拿出滴片，轻揭去盖玻片，形成胶板，放在37℃干浴锅上1‑3分钟后，将已经消化后得到的细胞悬液与37℃中的试剂N混合，均匀滴加胶板上，迅速盖上干净的盖玻片，将准备好的滴片放在4℃的环境中；S3、移除盖玻片，滴片放在试剂盒中，用PWM芯片调节泵进不同的液体。本发明具有操作便捷、使用方便、减少劳动强度，提高工作效率，事半功倍的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉赛维尔生物科技有限公司
发明人：	陈学建;王婷婷;杨安;易婷婷;张高英
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910872670.5
公开号：	CN110470520A
代理机构：	上海精晟知识产权代理有限公司
代理人：	汤蔚莉
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1.2期22栋5层2室
主权项：	1.一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、第一层胶的制备，将做好标记的载玻片放在50℃的干浴锅上1-3分钟后，取煮沸后冷却的试剂M 200ul滴在同样预热的载玻片的磨砂面，迅速盖上干净的盖玻片，制成滴片，将准备好的滴片放在4℃的环境中，放置至少30min使其凝固； S2、之后再制备第二层胶，从4℃环境中拿出滴片，轻揭去盖玻片，形成胶板，放在37℃干浴锅上1-3分钟后，将已经消化后得到的细胞悬液与37℃中的试剂N混合，均匀滴加胶板上，迅速盖上干净的盖玻片，将准备好的滴片放在4℃的环境中，放置至少30min使其凝固； S3、移除盖玻片，将载玻片放在试剂盒中，并对载玻片进行固定，用PWM芯片调节泵进不同的液体，从而实现换液这一步操作，通过旋转PWM调节芯片调节泵的开关，从而实现液体的上样流速。 2.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，PWM调节芯片调节泵包括PWM调节芯片和浇花泵以及连接管。 3.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于,在没有引入PWM调节芯片调节泵时，试剂N在操作中20s就凝固了，在引入PWM调节芯片调节泵时，试剂N在37℃上面1min后胶还没未凝固。 4.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，第一层胶的覆盖面大于第二层胶的覆盖面。 5.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，试剂M由琼脂与无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS组成，试剂M配置方法包括以下步骤： A1、称量0.8g琼脂糖溶于100ml的无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS中，微波炉加热煮沸； A2、将煮沸的试剂放在室温冷却待用。 6.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，试剂N由琼脂与无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS组成,试剂N配置方法包括以下步骤： B1、称量0.6g琼脂糖溶于100ml的无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS中，微波炉加热煮沸； B2、将煮沸的试剂放在37℃水浴锅中待用。 B3、取400ul试剂N于干净的1.5mlEP管中，将EP管放在37℃干浴锅上待用。
所属类别：	发明专利