详情

原文传递一种测定果蔬中179项农药残留量的方法

专利名称：	一种测定果蔬中179项农药残留量的方法
摘要：	一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，属于农药残留测量领域，解决了现有果蔬中农药残留量检测方法存在的问题。该方法包括：样品处理；提取；盐析；净化：将盐析后的提取液用气相色谱‑质谱检测器、液相色谱‑质谱联用仪分别进行测定；定性分析；定量分析：选择特征离子的定量离子进行积分，以外标法定量，计算公式为：X为试验样品中目标化合物含量，单位mg/kg；Ai为试验样品中目标化合物峰面积；As为标准溶液中目标化合物峰面积；C为标准溶液中目标化合物浓度，单位μg/mL；V为最终试验样品体积，单位mL；m为最终试验样品试样量，单位g。本发明具有测量结果准确可靠、测量效果好、测量效率高等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	谱尼测试集团吉林有限公司
发明人：	宋薇;王文娟;李闯;李佳;王占峰;张炳珏
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910788612.4
公开号：	CN110470765A
代理机构：	长春众邦菁华知识产权代理有限公司
代理人：	于晓庆
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	130000 吉林省长春市高新开发区飞跃东路999号一层
主权项：	1.一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、样品处理将样品去除杂质，取出样品待检测的代表性部分，粉碎后，3-4℃保存；步骤二、提取称取样品经预处理后加入蒸馏水稀释，经均质后获得样品提取液；步骤三、盐析步骤四、净化将盐析后的提取液用气相色谱-质谱检测器、液相色谱-质谱联用仪分别进行测定；步骤五、定性分析在保留时间窗口内出现与目标化合物特征离子保留时间一致的峰，且目标化合物特征离子与标准品特征离子的离子比率一致时，视为检出；步骤六、定量分析选择特征离子的定量离子进行积分，以外标法定量，计算公式为：式中：X为试验样品中目标化合物含量，单位mg/kg；Ai为试验样品中目标化合物峰面积；As为标准溶液中目标化合物峰面积；C为标准溶液中目标化合物浓度，单位μg/mL；V为最终试验样品体积，单位mL；m为最终试验样品试样量，单位g。 2.根据权利要求1所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤二中，提取的具体方法如下： (1)预处理： a、干净基质样品，磨碎成80-100目后，按样品与蒸馏水的质量比为1:1的比例称取样品和蒸馏水，放入三角瓶内混匀待用； b、复杂基质样品，按样品与蒸馏水的质量比为0.5:1的比例称取样品和蒸馏水，放入三角瓶内混匀待用； c、浓缩果汁类样品，按样品与蒸馏水的质量比为1:6的比例称取样品和蒸馏水，放入三角瓶内混匀待用； d、含水溶性色素类样品，按样品与蒸馏水的质量比为1:1的比例称取样品和蒸馏水，放入三角瓶内混匀待用； (2)均质：量取乙腈加入到三角瓶中，均质2min后用乙腈冲洗均质器转头，洗液收集到三角瓶中，获得样品提取液。 3.根据权利要求1所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤三中，盐析的具体方法如下：向100ml比色管中加入至少7g氯化钠，用移液管移取10mL、0.1M的磷酸缓冲液加入100ml比色管中；将漏斗放在比色管上，将滤纸放入漏斗内，将60mL样品提取液和洗液分三次倒入漏斗内，将20ml乙腈加入三角瓶内分三次清洗三角瓶，将洗液倒入漏斗内；过滤完毕后，盖上塞子轻轻晃动3min，轻轻摇晃比色管，将附着在壁面的盐洗入水层；待水层与有机层分离后，向比色管内加入20mL二氯甲烷，轻轻摇晃比色管，使二氯甲烷与乙腈充分混合；放置10min，直至有机溶剂与水完全分层，取出有机层到100ml茄型瓶中。 4.根据权利要求1所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤四中，将盐析后的提取液在低于40℃环境下加入0.1％的DEG旋转蒸发至干，用20％的甲醇/丙酮定容到5ml；然后用气相色谱-质谱检测器、液相色谱-质谱联用仪分别进行测定。 5.根据权利要求4所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤四中，用气相色谱-质谱检测器、液相色谱-质谱联用仪分别进行测定的具体方法如下： (1)干净基质样品 a、液相色谱-质谱部分净化用20ml、10mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液活化SAX/PSA小柱，10ml、20％甲醇/二氯甲烷溶液平衡，移取1ml甲醇/丙酮定容液于SAX/PSA柱中，用30ml、0.1mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液洗脱，用50ml茄型瓶接收洗脱液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG溶液于40℃下旋转蒸发，用2ml甲醇定容过0.22μm膜后进行LCMSMS测定； b、气相色谱-质谱部分净化用20ml、20％的甲苯/乙腈活化NH2，将剩余的4ml提取液旋转蒸发至干，20％的甲苯/乙腈按照2+3+5+5+5+5+5的顺序洗茄型瓶，将洗茄型瓶的洗液依次移入柱子，用50ml的茄型瓶收集流出液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG于40℃下旋转蒸发。用2ml丙酮定容过0.22μm膜后进行GCMS测定； (2)复杂基质样品 a、液相色谱-质谱部分净化双层填料-SPE小柱即Envi-Carb/SAX用20ml、10mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液活化，用10ml、20％甲醇/二氯甲烷溶液平衡，移取1ml甲醇/丙酮定容液于SAX/PSA柱中，用30ml、0.1mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液洗脱，用50ml茄型瓶接收洗脱液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG于40℃下旋转蒸发，用2ml甲醇定容过0.22μm膜后进行LCMSMS测定； b、气相色谱-质谱部分净化双层填料-SPE小柱即Envi-Carb/NH2用20ml、20％的甲苯/乙腈活化，将剩余的4ml提取液旋转蒸发至干，用20％的甲苯/乙腈按照2+3+5+5+5+5+5的顺序洗茄型瓶，将洗茄型瓶的洗液依次移入柱子，用50ml的茄型瓶收集流出液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG于40℃下旋转蒸发，用2ml丙酮定容过0.22μm膜后进行GCMS测定； (3)浓缩果汁类样品 a、液相色谱-质谱部分净化双层填料-SPE小柱即Envi-Carb/SAX用20ml、10mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液活化，用10ml、20％甲醇/二氯甲烷溶液平衡，移取1ml甲醇/丙酮定容液于SAX/PSA柱中，用30ml、0.1mM-NFPA-20％甲醇/二氯甲烷溶液洗脱，用50ml茄型瓶接收洗脱液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG于40℃下旋转蒸发，用2ml甲醇定容过0.22μm膜后进行LCMSMS测定； b、气相色谱-质谱部分净化双层填料-SPE小柱即弗罗里硅土柱用20ml、20％的甲苯/乙腈活化，将剩余的4ml提取液旋转蒸发至干，用20％的甲苯/乙腈按照2+3+5+5+5+5+5的顺序洗茄型瓶，将洗茄型瓶的洗液依次移入柱子，用50ml的茄型瓶收集流出液，待液面与填料齐平时，将残留在填料中的洗脱液挤压到茄型瓶中，加入100μL、1％PEG-2％TEG于40℃下旋转蒸发，用2ml丙酮定容过0.22μm膜后进行GCMS测定； (4)含水溶性色素类样品 a、液相色谱-质谱部分净化；参考复杂基质样品的净化； b、气相色谱-质谱部分净化；参考复杂基质样品的净化。 6.根据权利要求5所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤四中，LCMSMS测定条件如下： (1)液相色谱条件分析柱：Acquity BEH-C18，2.1mm×100mm，1.7μm；流速：0.45mL/min；进样量：10μL；柱温：40℃；流动相：甲醇+5mmol乙酸铵溶液；梯度条件如下： (2)质谱条件离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；电喷雾电压：3.0kv；离子源温度：110℃；去溶剂温度：400℃。 7.根据权利要求5所述的一种测定果蔬中179项农药残留量的方法，其特征在于，步骤四中，GCMS测定条件如下： (1)液相色谱条件色谱柱：毛细柱，农残分析专用柱DB-5MS；30m×0.25mm×0.25μm；柱温：程序升温；进样口温度：260.0℃；载气：氦气≥99.995％，1ml/min；进样量：1ul； (2)质谱条件 CC-MS接口温度：280℃；离子源温度：230.0℃；离子检测条件如下：速率℃/min 温度℃ 时间/min 初始 - 60.0 3.00 1 10.00 150.0 2.00 2 1.50 225.0 2.00 3 20.00 280.0 9.00 4 结束
所属类别：	发明专利