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原文传递蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法

专利名称：	蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法
摘要：	一种蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法，涉及饲料质量安全检测领域。该鉴别方法包括：将蛋白饲料原料经第一溶剂提取，用第二溶剂稀释，过滤，获得待测液。以土霉素、四环素和脱水四环素作为土霉素药渣的标志物，将待测液经液相色谱分离，质谱检测，鉴别蛋白饲料原料是否存在标志物，其中，第一溶剂为有机溶剂。该鉴别方法样品用量少，前处理过程简单，检测时间短、灵敏度较高，结果准确，能够有效鉴别蛋白饲料原料是否掺加土霉素药渣。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明人：	李阳;樊霞;田静;贾铮;肖志明;索德成;王石
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910862794.5
公开号：	CN110470780A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	严诚
分类号：	G01N30/34(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100000 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法，其特征在于，其包括：将蛋白饲料原料经第一溶剂提取，用第二溶剂稀释，过滤，获得待测液；以土霉素、四环素和脱水四环素作为土霉素药渣的标志物，将待测液经液相色谱分离，质谱检测，鉴别所述蛋白饲料原料是否存在所述标志物；其中，所述第一溶剂为有机溶剂。 2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述质谱检测中，以质荷比为461.1555m/z作为所述土霉素的特征碎片，以质荷比为445.1606m/z作为所述四环素的特征碎片，以质荷比为443.1450m/z作为所述脱水四环素的特征碎片。 3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，将所述待测液经液相色谱分离的步骤包括：以流动相A和流动相B进行梯度洗脱；其中，所述流动相A为1.5mM～2.5mM醋酸氨水溶液，所述醋酸氨水溶液中含有0.15v/v％～0.25v/v％的甲酸；所述流动相B为乙腈。 4.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于，所述梯度洗脱的步骤中，以体积百分比计，按照以下方式进行： 0～0.5min时，所述流动相A保持为95％，所述流动相B保持为5％； 0.5～3.0min时，所述流动相A由95％减小至85％，所述流动相B由5％增加至15％； 3.0～10.0min时，所述流动相A由85％减小至60％，所述流动相B由15％增加至40％； 10.0～18.0min时，所述流动相A由60％减小至0，所述流动相B由40％增加至100％； 18.0～23.0min时，所述流动相A保持为0，所述流动相B保持为100％； 23.0～25.0min时，所述流动相A保持为95％，所述流动相B保持为5％；可选地，所述梯度洗脱的流速为0.3～0.5mL/min。 5.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述液相色谱分离的步骤中，所用的色谱柱的固定相为十八烷基官能团；可选地，所述色谱柱为Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱；可选地，所述色谱柱的柱温为38℃～42℃。 6.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述质谱检测包括：采用四级杆飞行时间质谱对经所述液相色谱分离后的产物进行检测；可选地，所述质谱检测的条件为：电喷雾电离源；正离子扫描，扫描范围400-500m/z；干燥气温度：250℃；干燥气流量：7L/min；雾化气压力：7psi；鞘气温度：325℃；鞘气流量：11L/min；喷嘴电压200V；毛细管电压：3kV；毛细管出口电压：120V；Skimmer电压750V。 7.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述第二溶剂包括浓度为1.5mM～2.5mM醋酸氨水溶液，所述醋酸氨水溶液中含有0.15v/v％～0.25v/v％的甲酸。 8.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述蛋白饲料原料的粒径≥18目；可选地，所述蛋白饲料原料的粒径为18～40目。 9.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述第一溶剂包括甲醇。 10.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，将所述蛋白饲料原料经第一溶剂提取的步骤包括：将所述蛋白饲料原料与所述第一溶剂按照1g：(8ml～12ml)混合，振荡提取，获得提取液；将所述提取液离心后取上清液；可选地，将所述提取液以5000r/min～7000r/min的速率离心4min～6min；可选地，所述蛋白饲料原料包括菜籽粕、豆粕和棉粕中的至少一种。
所属类别：	发明专利