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原文传递金属有机骨架复合物比率电化学miR3123适体传感器的制备方法

专利名称：	金属有机骨架复合物比率电化学miR3123适体传感器的制备方法
摘要：	本发明公开了基于黑磷纳米片BPNSs和硫堇TH掺杂的铜基金属有机骨架Cu‑MOF复合物的比率电化学miR3123适体传感器的制备方法。将TH与Cu‑MOF前驱体反应制备TH/Cu‑MOF，滴涂BPNSs制备BPNSs/TH/Cu‑MOF，将其滴涂在电极上。二茂铁Fc标记的DNA单链适体吸附在BPNSs上，制得适体‑BPNSs/TH/Cu‑MOF。靶分子miR3123与DNA单链适体Fc‑DNA结合，使Fc‑DNA脱离BPNSs，引起Fc电化学信号减弱，而对TH信号影响甚微。拟合电流峰强度比率IFc/ITH与miR3123浓度之间的线性关系，构建比率电化学miR3123适体传感器。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛大学
发明人：	桂日军;孙玉娇;金辉;姜晓文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910796313.5
公开号：	CN110455896A
代理机构：	青岛高晓专利事务所(普通合伙)
代理人：	张世功
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	266071山东省青岛市崂山区香港东路7号
主权项：	1.金属有机骨架复合物比率电化学miR3123适体传感器的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤： (1)TH/Cu-MOF复合物的制备：称取4mg三水合硝酸铜、10μL三氟乙酸和10mg聚乙烯吡咯烷酮分别加入12mL混合溶剂中，含有9mL N,N-二甲基甲酰胺和3mL乙醇，搅拌均匀形成混合液A，称取4mg的4,4’,4”,4”’-(卟吩-5,10,15,20-四烷基)四苯甲酸和4mg硫堇分别加入含有3mL N,N-二甲基甲酰胺和1mL乙醇的混合溶剂中，搅拌均匀形成混合液B，将混合液A逐滴加入混合液B中，搅拌和超声作用10min后，将A-B混合液加热至80℃反应3h，反应产物溶液在8000rpm转速下离心10min，用乙醇和蒸馏水洗涤、干燥后得到TH/Cu-MOF复合物，将此复合物分散在乙醇中备用； (2)BPNSs/TH/Cu-MOF复合物的制备：称取15mg黑磷块状晶体加入30mL的1-甲基-2-吡咯烷酮中，在超声波清洗机中处理6h后，转入探头式超声波发生器中处理4h，超声处理后的分散液在10000rpm转速下离心20min去除尺寸较大的产物，取上层分散液在3500rpm转速下离心20min，得到BPNSs分散液，将其逐滴加入TH/Cu-MOF复合物的分散液中，保持搅拌和超声处理1h，然后在8000rpm转速下离心15min，制得BPNSs/TH/Cu-MOF复合物分散液备用； (3)适体-BPNSs/TH/Cu-MOF纳米复合物的制备：在抛光打磨处理后的裸玻碳电极表面滴加交联剂Nafion，然后滴涂BPNSs/TH/Cu-MOF复合物分散液，形成该复合物改性的玻碳电极，将此改性电极浸没在含有1～10μM的miR3123对应DNA单链适体Fc-DNA的磷酸盐水缓冲液中，在37℃下孵育2h，然后取出电极，自然干燥后在电极表面制得适体-BPNSs/TH/Cu-MOF纳米复合物； (4)以适体-BPNSs/TH/Cu-MOF纳米复合物改性的玻碳电极为工作电极，置于电化学工作站的三电极体系中，以磷酸盐水缓冲液为电解液，向其中加入一定量miR3123，测定不同miR3123浓度下的电化学方波伏安曲线，以TH和Fc的氧化还原电流峰强度为参比信号和响应信号，拟合两个电流峰强度比率IFc/ITH与miR3123浓度之间的线性关系，构建用于miR3123定量检测的比率电化学适体传感器，其中，miR3123的线性检测浓度范围为1nM～10μM，检测限为1～5nM。
所属类别：	发明专利