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原文传递微小物质封入方法及微小物质检测方法以及微小物质检测用装置

专利名称：	微小物质封入方法及微小物质检测方法以及微小物质检测用装置
摘要：	本发明提供，作为利用简易操作，将核酸、蛋白质、病毒及细胞等检测对象物质封入极小容积的液滴中，能够进行高灵敏度检测的技术，在基板表面互相分开形成的多个凹部的至少一部分中封入微小物质的方法，其至少包括以下步骤：(1)第一步骤，在上述基板的凹部形成面的上方配置插入体，该插入体与上述基板的相对位置根据设置于上述插入体的支持部进行定位，将上述插入体的下表面与上述基板的上述凹部形成面对向配置，由此在上述插入体的下表面与上述基板的上述凹部形成面之间设置溶液导入空间，并且设置与上述溶液导入空间连通的溶液排出空间，使所述溶液排出空间位于上述插入体的上述下表面的上方，且在上述基板与上述插入体之间、上述基板内和/或上述插入体内。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	日本;JP
申请人：	国立研究开发法人科学技术振兴机构
发明人：	野地博行;田端和仁
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201880021677.X
公开号：	CN110462365A
代理机构：	中科专利商标代理有限责任公司
代理人：	张国梁;张莹
分类号：	G01N1/04(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	日本埼玉县
主权项：	1.在基板的表面互相分开形成的多个凹部的至少一部分中封入微小物质的方法，其包括： (1)第一步骤，在所述基板的凹部形成面的上方配置插入体，该插入体与所述基板的相对位置根据设置于所述插入体的支持部进行定位，将所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面对向配置，由此在所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面之间设置溶液导入空间，且，设置与所述溶液导入空间连通的溶液排出空间，使所述溶液排出空间位于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间、所述基板内和/或所述插入体内；以及 (2)第二步骤，将包含所述微小物质和第一溶剂的第一溶液导入所述溶液导入空间内；以及 (3)第三步骤，将包含与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂的第二液体导入所述溶液导入空间，将被导入到所述溶液导入空间和所述凹部内的所述第一溶剂中的被导入到所述溶液导入空间的所述第一溶剂向所述溶液排出空间排出，由此在所述凹部内形成被所述第二液体包覆且包含所述微小物质的所述第一液体的液滴。 2.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述第一步骤中，将所述溶液排出空间设置在所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间。 3.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述第一步骤中，将所述溶液排出空间设置在所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板内。 4.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述第一步骤中，将所述溶液排出空间设置在所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间并在所述基板内。 5.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述第一步骤中，将所述溶液排出空间设置在所述插入体的所述下表面的上方，且在所述插入体内。 6.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述第一步骤中，将所述溶液排出空间设置在所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间并在所述插入体内。 7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中，在所述第二步骤中，将所述第一溶液通过流动路径导入到所述溶液导入空间，所述流动路径形成于所述插入体和/或所述基板并在所述溶液导入空间具有出口。 8.根据权利要求2所述的方法，其中，所述插入体具有在插入方向的两端具备凸缘的筒管状形状，使该插入体的所述下表面为与所述基板的所述凹部形成面具有大致相同形状的第一凸缘，该第一凸缘将所述基板的所述凹部形成面的上方空间划分为以下两个空间：位于该第一凸缘与所述凹部形成面之间的所述溶液导入空间、和位于该第一凸缘上方的所述溶液排出空间。 9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，在所述第二步骤与所述第三步骤之间，进一步包括控制所述基板温度的步骤，所述基板形成有孔。 10.在基板的表面互相分开形成的多个凹部的至少一部分中封入微小物质的方法，其包括： (A)将插入体配置于所述基板的凹部形成面的上方，使得该插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面相对，向由此形成的所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面之间的溶液导入空间，导入包含所述微小物质和第一溶剂的第一溶液的步骤，以及 (B)将包含与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂的第二液体导入所述溶液导入空间，将被导入到所述溶液导入空间和所述凹部内的所述第一溶剂中的被导入到所述溶液导入空间的所述第一溶剂，向与所述溶液导入空间连通的溶液排出空间排出，由此在所述凹部内形成被所述第二液体包覆且包含所述微小物质的所述第一液体的液滴的步骤。 11.检测在基板的表面互相分开形成的多个凹部的至少一部分中封入的微小物质的方法，其包括 (1)第一步骤，在所述基板的凹部形成面的上方配置插入体，该插入体与所述基板的相对位置根据设置于所述插入体的支持部进行定位，将所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面对向配置，由此在所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面之间设置溶液导入空间，且，设置与所述溶液导入空间连通的溶剂排出空间，使所述溶剂排出空间位于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间、所述基板内和/或所述插入体内；以及 (2)第二步骤，将包含所述微小物质和第一溶剂的第一溶液导入所述溶液导入空间内；以及 (3)第三步骤，将包含与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂的第二液体导入所述溶液导入空间内，将被导入到所述溶液导入空间和所述凹部内的所述第一溶剂中的被导入到所述溶液导入空间的所述第一溶剂向所述溶液排出空间排出，由此在所述凹部内形成被所述第二液体包覆且包含所述微小物质的所述第一液体的液滴；以及 (4)第四步骤，光学、电和/或磁性检测在所述液滴内存在的所述微小物质。 12.基于生色底物的吸光度变化和/或荧光，光学检测在基板的表面互相分开形成的多个凹部的至少一部分中封入的微小物质的方法，其包括： (1)第一步骤，在所述基板的凹部形成面的上方配置插入体，该插入体与所述基板的相对位置根据设置于所述插入体的支持部进行定位，将所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面对向配置，由此在所述插入体的下表面与所述基板的所述凹部形成面之间设置溶液导入空间，且，设置与所述溶液导入空间连通的溶剂排出空间，使所述溶剂排出空间位于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间、所述基板内和/或所述插入体内；以及 (2)第二步骤，将包含所述微小物质和所述生色底物和第一溶剂的第一溶液导入所述溶液导入空间内；以及 (3)第三步骤，将包含与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂的第二液体导入所述溶液导入空间，将被导入到所述溶液导入空间和所述凹部内的所述第一溶剂中的被导入到所述溶液导入空间的所述第一溶剂向所述溶液排出空间排出，由此在所述凹部内形成被所述第二液体包覆且包含所述微小物质的所述第一液体的液滴；以及 (4)第四步骤，检测将在所述液滴内存在的所述生色底物的吸光度变化和/或荧光。 13.微小物质检测用装置，其包含：具备互相分开而形成多个封入微小物质的凹部的表面的基板、和在所述基板的凹部形成面的上方配置的插入体，所述插入体具备用于定位与所述基板的相对位置的支持部，在所述基板的所述凹部形成面与在其上方对向配置的所述插入体的下表面之间，设置溶液导入空间，设置与所述溶液导入空间连通的溶液排出空间，使所述溶液排出空间位于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间、所述基板内和/或所述插入体内；且，在所述插入体和/或所述基板形成有在所述溶液导入空间具有出口的流动路径。 14.根据权利要求13所述的装置，其被构成为能够使得在所述溶液导入空间内保持的第一溶剂置换为与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂，并向所述溶液排出空间排出，所述第二溶剂通过所述流动路径被导入所述溶液导入空间内。 15.根据权利要求14所述的装置，其被构成为使得在所述溶液导入空间内及所述凹部内保持的包含所述微小物质和所述第一溶剂的第一液体中的在所述溶液导入空间内保持的该第一液体，利用第二液体向所述溶液排出空间排出，在所述凹部内形成被所述第二液体包覆且包含所述微小物质的所述第一液体的液滴，所述第二液体通过所述流动路径被导入所述溶液导入空间内，并包含与所述第一溶剂为非混合性的第二溶剂。 16.根据权利要求13所述的装置，其中，所述溶剂排出空间设置于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间。 17.根据权利要求13所述的装置，其中，所述溶剂排出空间设置于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板内。 18.根据权利要求13所述的装置，其中，所述溶剂排出空间设置于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间并在所述基板内。 19.根据权利要求13所述的装置，其中，所述溶剂排出空间设置于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述插入体内。 20.根据权利要求13所述的装置，其中，所述溶剂排出空间设置于所述插入体的所述下表面的上方，且在所述基板与所述插入体之间并在所述插入体内。 21.根据权利要求13所述的装置，其中，所述插入体具有在插入方向的两端具备凸缘的筒管状形状，使该插入体的所述下表面为与所述基板的所述凹部形成面具有大致相同形状的第一凸缘，该第一凸缘将所述基板的所述凹部形成面的上方空间划分为以下两个空间：位于该第一凸缘与所述凹部形成面之间的所述溶液导入空间、和位于该第一凸缘的上方的所述溶液排出空间。 22.根据权利要求21所述的装置，其中，所述支持部为在所述插入体的上端侧环绕设置的第二凸缘，该第二凸缘在向所述基板的凹部形成面的上方配置时与所述基板锁合，所述插入体的从所述第一凸缘到该第二凸缘的高度为所述溶液排出空间的高度。 23.根据权利要求21所述的装置，其中，所述支持部为配置于所述插入体的所述下表面的突起，所述突起的高度为所述溶液导入空间的高度。 24.根据权利要求21～23中任一项所述的装置，其中，在向所述凹部形成面的上方配置时，该第一凸缘与所述基板之间形成的间隙以液体能够流通的方式连通所述溶液导入空间与所述溶液排出空间。 25.根据权利要求20～22中任一项所述的装置，其中，所述插入体的所述第一凸缘具有缺口，在向所述凹部形成面的上方配置时，该缺口以液体能够流通的方式连通所述溶液导入空间与所述溶液排出空间。 26.根据权利要求13～25中任一项所述的装置，其中，所述插入体至少在其下表面中为不透光性的。 27.根据权利要求13～26中任一项所述的装置，其中，在所述插入体向所述基板的凹部形成面的上方配置时，所述支持部与所述基板嵌合。 28.根据权利要求13～27中任一项所述的装置，其进一步具备控制所述基板的温度的温度调节器。 29.根据权利要求13～28中任一项所述的装置，其进一步具备对所述凹部内存在的所述微小物质进行光学、电和/或磁性检测的检测器。
所属类别：	发明专利