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原文传递一种检测多肽及以多肽为识别分子检测细菌的方法及装置

专利名称：	一种检测多肽及以多肽为识别分子检测细菌的方法及装置
摘要：	本发明涉及聚合物敏感膜离子选择性电极，具体的说是一种检测多肽及以多肽为识别分子检测细菌的方法及装置。待检测样品中带正电或负电的多肽及其衍生物在离子交换剂掺杂的聚合物膜电极上产生电位响应，进而实现对样品中多肽及其衍生物快速的定量/定性检测。本发明中，多肽同时作为识别元件和指示离子，应用范围宽，具有通用性；电极响应快速，操作简单，具有很好的实际应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	中国科学院烟台海岸带研究所
发明人：	丁家旺;吕恩广;秦伟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910782118.7
公开号：	CN110487870A
代理机构：	沈阳科苑专利商标代理有限公司
代理人：	李颖
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号
主权项：	1.一种检测多肽的方法，其特征在于：待检测样品中带正电或负电的多肽及其衍生物在离子交换剂掺杂的聚合物膜电极上产生电位响应，进而实现对样品中多肽及其衍生物快速的定量/定性检测。 2.按权利要求1所述检测多肽的方法，其特征在于：所述检测采用开路电位方式检测或多电流阶跃的技术检测。 3.按权利要求1所述检测多肽的方法，其特征在于：所述多肽为将相同或不同种类及个数的氨基酸以肽键的方式连接的肽链；多肽衍生物为经修饰的所述多肽；所述测定多肽之后，施加特定方向电流来实现多肽在膜内的渗出，从而实现电极的可逆、重复利用。 4.一种以多肽为识别分子检测细菌的方法，其特征在于：多肽作为识别分子和信号传导分子，与待检测液中细菌相互作用，使离子交换剂掺杂的聚合物膜电极电位变化，实现对待检测液中细菌的定性/定量检测；或，多肽或多肽衍生物固定在磁珠上得到多肽功能化磁珠，多肽作为识别分子和信号传导分子，与待检测液中细菌相互作用，使多肽功能化磁珠在离子交换剂掺杂的聚合物膜电极电位变化，实现对待检测液中细菌的定性/定量检测。 5.按权利要求4所述的以多肽为识别分子检测细菌的方法，其特征在于：所述多肽功能化磁珠中多肽与待检测样品中细菌相互作用，使多肽功能化磁珠中多肽电荷以及电荷密度发生变化，在外加磁场的作用下多肽功能化磁珠上多肽有效萃取到聚合物敏感膜量减少，引起电极电位变化，实现对待检测液中细菌的定性/定量检测。 6.按权利要求4所述的以多肽为识别分子检测细菌的方法，其特征在于：所述多肽为将相同或不同种类及个数的氨基酸以肽键的方式连接的肽链；多肽衍生物为经修饰的所述多肽。 7.按权利要求6所述的以多肽为识别分子检测细菌的方法，其特征在于：所述多肽为识别革兰氏阴性菌的多肽序列VFQFLGKIIHHVGNFVHGFSHVF-NH2、识别广谱细菌的多肽序列WKKQLQLQLQLQLQLKKGGGC、识别大肠杆菌的多肽序列GIGKFLHSAGKFGKAFVGEIMKS、识别金黄色葡萄球菌的多肽序列RVRSAPSSS、识别单增李斯特菌的多肽序列WGEAFSAGVHRLAN、识别沙门氏菌的多肽序列NRPDSAQFWLHHGGGSC、识别沙门氏菌的多肽序列NRPDSAQFWLHHGGGSC、识别绿脓杆菌的多肽序列KKHRKHRKHRKHGGSGGSKNLRRIIRKGIHIIKKYGC、识别迟钝爱德华菌的多肽序列WVWPARLGGK或半选择性多肽KYYGNGVHCTKSGCSVNWGEAFSAGVHRLANGGNGFW或对致病菌、微生物有识别作用的随机序列。 8.按权利要求4-7任意一项所述的以多肽为识别分子检测细菌的方法，其特征在于：所述离子交换剂掺杂的聚合物膜电极为电极底部粘附掺杂离子交换剂的聚合物膜，所述膜成分按重量份数计，20％-80％膜基体、20％-80％增塑剂，余量为离子交换剂；膜基体为聚氯乙烯，聚丁基丙烯酸酯，聚醚酰亚胺，橡胶或溶胶凝胶膜；增塑剂为邻硝基苯辛醚，二-2-乙基己基癸酯，癸二酸二丁酯或癸二酸二辛酯；离子交换剂为阴离子交换剂或阳离子交换剂；其中，阴离子交换剂为三十二烷基甲基氯化铵、三十二烷基甲基氯化铵衍生物、三十四烷基甲基氯化铵或三十四烷基甲基氯化铵衍生物；阳离子交换剂为四(4-氯苯基)硼酸钾、四(对甲苯基)硼酸钠、四(3,5-二(三氟甲基)苯基)硼酸钠、二壬基萘磺酸、二壬基萘磺酸盐或硼酸盐或上述各化合物衍生物；所述上述电位测定之后，改变外部磁场方向实现多肽修饰磁珠在膜上的分离或渗出，实现电极的可逆、重复利用。 9.一种权利要求1或4所述检测方法的装置，其特征在于：装置包括检测池、工作电极、参比电极、对电极和电化学外部测量装置；所述工作电极为离子交换剂掺杂的聚合物膜电极，其置于检测池中，工作电极、参比电极、对电极分别与电化学外部测量装置相连接。 10.按权利要求9所述的装置，其特征在于：所述装置包括外加磁场。
所属类别：	发明专利