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原文传递 一种中草药活性的检测方法
专利名称: 一种中草药活性的检测方法
摘要: 本发明公开了一种中草药活性的检测方法,所述检测方法至少包括如下步骤:提供培养板;在所述培养板上接种靶细胞;将经过所述中草药作用后的中性粒细胞作用于所述靶细胞;向所述培养板中添加检测试剂;检测所述培养板中吸光度的变化;根据所述吸光度的变化判断所述中草药活性大小。本发明能根据中草药活性来合理利用中草药。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 上海;31
申请人: 同济大学
发明人: 陈炳地;黄鑫;乐文俊;崔征
专利状态: 有效
申请日期: 2019-07-25T00:00:00+0800
发布日期: 2019-11-26T00:00:00+0800
申请号: CN201910677773.6
公开号: CN110501483A
代理机构: 上海光华专利事务所(普通合伙)
代理人: 王华英
分类号: G01N33/50(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 200092 上海市杨浦区四平路1239号
主权项: 1.一种中草药活性的检测方法,其特征在于,所述检测方法至少包括如下步骤: 提供培养板; 在所述培养板上接种靶细胞; 将经过所述中草药作用后的中性粒细胞作用于所述靶细胞; 向所述培养板中添加检测试剂; 检测所述培养板中吸光度的变化; 根据所述吸光度的变化判断所述中草药活性大小。 2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述靶细胞包括癌细胞。 3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述靶细胞的密度为100-1000000细胞/孔。 4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述中草药的提取液的制备步骤包括, 称取所述中草药,加入超纯水; 将所述中草药粉碎或破壁30秒–10小时,获得中草药水溶液; 吸取所述中草药水溶液进行离心,获得上层液; 吸取所述上层液再次进行离心,所得上清液为所述中草药的提取液。 5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,获得所述中性粒细胞的步骤包括, 将所述中草药的提取液加入到外周血中,进行体外孵育; 提供若干组浓度梯度的淋巴细胞分离液于离心管中; 利用所述若干组浓度梯度的淋巴细胞分离液,通过分离提取获得所述中性粒细胞。 6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,所述淋巴细胞分离液的组数为2-10组。 7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,将中性粒细胞作用于所述靶细胞的步骤包括, 将所述中性粒细胞以1:3-100:1的效靶比加入到所述靶细胞中,进行培养。 8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述培养板包括96孔细胞培养板。 9.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述检测试剂包括细胞增殖/毒性检测试剂、噻唑蓝试剂、台盼蓝试剂、乳酸脱氢酶活性检测试剂和细胞凋亡检测试剂。 10.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述培养板上还包括与接种所述靶细胞相同面积的若干区域。
所属类别: 发明专利
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