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原文传递 一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法
专利名称: 一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法
摘要: 本发明提供了一种利用FI‑UV指纹图谱快速鉴定不同来源防己的方法,其鉴定方法包括以下步骤:防己供试品的制备、FI‑UV指纹图谱的制作、FI‑UV指纹图谱数据前处理、化学计量学分析以及可视化结果鉴定,本发明利用HPLC技术,不经过色谱柱分离,只经过保护柱,仅起到粗分及防止蛋白质、多肽等植物成分对检测器的污染,进而实现快速检测功能,再利用液相色谱仪的二极管阵列检测器的在线扫描功能,对总流出曲线的色谱峰进行在线扫描,获得流出曲线及其扫描数据,再结合PCA和PLS‑DA化学计量学手段,实现防己快速可视化鉴定,无专业背景人员也可快速理解。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 安徽;34
申请人: 安徽中医药高等专科学校
发明人: 秦亚东;汪荣斌;周娟娟;张静文;张梦雨
专利状态: 有效
申请日期: 2019-10-09T00:00:00+0800
发布日期: 2019-12-31T00:00:00+0800
申请号: CN201910951715.8
公开号: CN110632206A
代理机构: 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 陈娟
分类号: G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址: 241003 安徽省芜湖市弋江区乌霞山西路18号
主权项: 1.一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法,其特征在于,鉴定方法包括以下步骤: S1、防己供试品的制备:利用粉碎机将不同来源的防己分别粉碎;利用电子分析天平称取粉碎后的防己粗粉各1.00g,往称取的防己粗粉加入甲醇水溶液100ml,利用超声波提取仪对得到的防己和甲醇水溶液超声处理1h后放置室温,补足损失重量,用甲醇水定容到100ml,利用0.45μm有机滤膜对得到的溶液过滤后,即得防己供试品溶液; S2、FI-UV指纹图谱的制作:利用液相色谱仪分别对得到的每一个防己供试品溶液进行色谱分析,并分别记录下每一个防己的FI-UV指纹图谱; S3、FI-UV指纹图谱数据前处理:将得到的FI-UV指纹图谱数据以CSV格式导出,然后分别导出总流出曲线色谱图和平均紫外光谱图,每个样品总流出曲线图2min,包含2401个数据点,且每个样品重复测试3次,设样品数为n,则形成n×3×2401的数据矩阵,平均光谱图的数据矩阵为n×3×211的数据矩阵; S4、化学计量学分析:将样品FI-UV测试所得到的数据矩阵导入SIMCA-P、ORIGIN或SPSS数据分析软件,进行数据标准化处理,再进行主成分分析(PCA)和最小偏二乘分析(PLS-DA),并利用PLS-DA分析找到特征变量; S5、可视化结果鉴定:根据总流出曲线中色谱峰的聚集范围,实现防己药材内在质量评价和鉴定分类;根据PCA、PLS-DA的得分图鉴别分类不同来源防己药材;根据PLS-DA可快速寻求紫外特征变量191、212、219、244、258、284、304nm,并以特征变量为数据库可再实现PCA分析,最终实现不同来源防己的鉴定。 2.根据权利要求1所述的一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法,其特征在于,所述步骤S1中甲醇水溶液为30-70%的甲醇水溶液。 3.根据权利要求1所述的一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法,其特征在于,所述步骤S1中超声提取仪的功率设置为250W,频率为50Hz。 4.根据权利要求1所述的一种利用FI-UV指纹图谱鉴定不同来源防己的方法,其特征在于,所述步骤S2中液相色谱仪为安捷伦1290型高效液相色谱色谱仪,色谱柱型号为AgilentSB-C18 column(5×2.1mm,1.8μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-纯净水:50:50(V/V)等度洗脱,且效液相色谱仪的流速为0.2mL/min、进样量为2Ml、扫描频率20Hz、扫描步进值1nm、扫描范围为190-400nm,波长276nm。
所属类别: 发明专利
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