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原文传递一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法

专利名称：	一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法
摘要：	本发明公开了一种柱前衍生高效液相色谱‑荧光检测器测定荞麦中D‑荞麦碱的方法。以芴甲氧酰氯为衍生试剂，pH＝8.5、20℃水浴反应20min进行衍生。采用岛津LC‑20A高效液相色谱仪，RF‑20A荧光检测器；TIANHE Kromasil C18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱；柱温为28℃；流动相为40：60(v/v)的乙腈：0.1％的乙酸水溶液；流速为1mL/min；激发波长为240nm，发射波长为315nm；分析时间为40min；进样量为10μL进行测定，并记录峰面积。采用外标法绘制D‑荞麦碱衍生物峰面积‑衍生物浓度标准曲线，进而计算得出样品中D‑荞麦碱的含量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西北农林科技大学
发明人：	王敏;朱瑞雪;韩林;王玉堂;方纯;彭强
专利状态：	有效
申请日期：	2018-11-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-31T00:00:00+0800
申请号：	CN201811408499.4
公开号：	CN110632187A
代理机构：	北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	李冉
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	712100 陕西省咸阳市杨凌区邰城路3号
主权项：	1.一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于采用柱前衍生、高效液相色谱法进行测定，具体步骤包括： (1)荞麦样品的配制； (2)D-荞麦碱系列标准溶液的配制； (3)样品及D-荞麦碱系列标准溶液的衍生； (4)将D-荞麦碱系列标准溶液衍生物用0.22μm针头过滤器过滤，采用高效液相色谱法测定D-荞麦碱衍生物并记录峰面积，以外标法绘制D-荞麦碱系列标准溶液衍生物峰面积-衍生物浓度标准曲线，得出标准曲线回归方程； (5)将样品衍生物用0.22μm针头过滤器过滤，采用高效液相色谱法测定样品衍生物中D-荞麦碱并记录峰面积，根据步骤(4)中回归方程计算得出样品中D-荞麦碱的含量；所述色谱条件为：岛津LC-20A高效液相色谱仪配RF-20A荧光检测器；色谱柱：TIANHE Kromasil C18(5μm,4.6mm×250mm)；柱温：28℃；流动相：乙腈/0.1％的乙酸水，40/60(v/v)；流速：1mL/min；激发波长：240nm，发射波长：315nm；进样量：10μL；分析时间：40min。 2.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述的衍生试剂为芴甲氧酰氯。 3.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述的待衍生物与衍生试剂用量为1:2(v/v)。 4.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述的衍生反应温度为20℃。 5.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述的衍生反应时间为20min。 6.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述的衍生反应条件为pH＝8.5。 7.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述色谱柱温度为28℃。 8.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述流动相为乙腈：0.1％的乙酸水＝40:60(v/v)。 9.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述流动相流速为1mL/min。 10.根据权利要求1所述的一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法，其特征在于：所述激发波长为240nm，发射波长为315nm。
所属类别：	发明专利