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原文传递用于测定转染的装置和方法

专利名称：	用于测定转染的装置和方法
摘要：	本发明涉及一种用于测定细胞或细胞组的转染的体外方法，其中所述测定通过光谱进行。测定包括借助拉曼光谱法记录细胞或细胞组的至少一个拉曼光谱。此外，本发明涉及用于测定细胞或细胞组的转染的装置，其中所述装置包括作为第一单元(i)的显微镜系统，以可视化细胞；作为第二单元(ii)的拉曼光谱系统，以记录细胞或细胞组的拉曼光谱；和作为第三单元(iii)的评估模块，其与拉曼光谱系统连接并且其配置为借助记录的拉曼光谱来测定细胞或细胞组是否已经被转染。使用主成分分析公开了拉曼光谱数据的统计分析。在PCA得分图中，可以看到转染样品与对照样品在PC‑1轴上不同。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	德国;DE
申请人：	塞尔图股份有限公司
发明人：	K·许策;R·许策
专利状态：	有效
申请日期：	2017-07-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201780053749.4
公开号：	CN109690294A
代理机构：	广州嘉权专利商标事务所有限公司
代理人：	江侧燕
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	德国贝尔恩里德
主权项：	1.一种用于测定细胞或细胞组的转染的体外方法，其中所述测定通过光谱进行。 2.根据权利要求1所述的方法，其中所述测定包括借助拉曼光谱法记录所述细胞或细胞组的至少一个拉曼光谱。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其中在约5分钟至约60分钟的时间段内测定所述转染。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述细胞组是一组约60至约500个细胞。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述细胞来自相同来源和/或是相同的类型。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述细胞是上皮细胞、成纤维细胞、干细胞、神经元细胞、血细胞、癌细胞、皮肤细胞、心脏细胞，优选色素上皮细胞或iPS细胞的前体。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述测定包括借助集成的拉曼显微镜-光谱系统记录所述细胞或细胞组的至少一个拉曼光谱。 8.根据权利要求7所述的方法，额外地包括所述细胞或细胞组的形态测定和/或在细胞之间或所述细胞组内的形态比较的步骤。 9.根据权利要求8所述的方法，其中转染的所述测定是在所述细胞的亚单位处通过记录至少一个拉曼光谱进行。 10.根据权利要求9所述的方法，其中所述细胞的亚单位是细胞核、细胞质、细胞膜区域、线粒体、空泡结构或微管组织中心(MTC)。 11.根据权利要求7-10中任一项所述的方法，额外地包括荧光表征所述细胞或细胞组和/或在细胞之间或所述细胞组内对比的步骤。 12.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，额外地包括在显微视野下用虚拟标签标记感兴趣的细胞以允许可视跟踪。 13.根据权利要求2-12中任一项所述的方法，其中所述方法包括对至少一个拉曼光谱进行统计评估。 14.根据权利要求13所述的方法，其中所述方法包括主成分分析和/或聚类分析，其中使用预定阈值以区分转染的和未转染的细胞。 15.根据权利要求2-14中任一项所述的方法，其中借助评估拉曼光谱来鉴定细胞或细胞组的转染。 16.根据权利要求15所述的方法，其中评估拉曼光谱包括拉曼光谱的光谱分析。 17.根据权利要求15或16所述的方法，其中定量测定所述细胞组的哪个比例的细胞进行了转染。 18.根据权利要求17所述的方法，其中为了定量测定所述细胞组的哪个比例的细胞进行了转染，对多个记录的拉曼光谱分别进行统计分析，例如主成分分析。 19.根据权利要求2-18中任一项所述的方法，其中评估拉曼光谱包括在光阱中收集并捕获一个细胞，以记录拉曼光谱。 20.根据权利要求19所述的方法，其中所述光阱借助拉曼光谱系统的激发光束产生。 21.根据权利要求1或20任一项所述的方法，其中待测定的所述细胞或细胞组位于微流体系统或微流体通道中。 22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中转染的所述测定基于计算机进行，以便自动或半自动地测定转染。 23.根据权利要求22所述的方法，其中所述自动测定包括扫描步骤，其中在限定的区域中自动收集拉曼光谱。 24.根据利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述方法用于测定一组细胞的转染率。 25.根据权利要求1-24中任一项所述的方法，其中所述细胞或细胞组是活细胞或活细胞组；或固定的细胞或固定的细胞组。 26.根据权利要求1-25中任一项所述的方法，其中所述方法包括分离转染的和未转染的细胞的额外步骤。 27.根据权利要求26所述的方法，其中所述分离的转染的细胞能够重新引入或植入人或动物体内。 28.用于测定细胞或细胞组的转染的装置，其中所述装置包括作为第一单元(i)的显微镜系统，以可视化和/或荧光表征细胞；作为第二单元(ii)的拉曼光谱系统，以记录细胞或细胞组的拉曼光谱；和作为第三单元(iii)的评估模块，其与拉曼光谱系统连接并且其配置为借助记录的拉曼光谱测定细胞或细胞组是否已经被转染。 29.根据权利要求28所述的装置，其中所述装置包括作为第四单元(iv)的微流体组件，用于半自动测量和/或传输和/或分离所述细胞，所述微流体组件与拉曼光谱系统连接。 30.根据权利要求28或29所述的装置，其中所述第一单元和第二单元是集成的拉曼显微镜-光谱系统。 31.根据权利要求28-30中任一项所述的装置，其中所述第二单元是用于进行聚类分析和/或主成分分析的评估模块，其配置为鉴定细胞或细胞组的转染。 32.根据权利要求28-31中任一项所述的装置，其中所述装置配置为基于计算机进行转染的测定，以自动或半自动地测定转染。 33.根据权利要求28-32中任一项所述的装置，其中所述装置配置为借助荧光显微术额外地进行细胞的测定。 34.根据权利要求28-33中任一项所述的装置，其中所述装置配置为额外地进行所述细胞或细胞组的形态测定和/或所述细胞组的形态比较。 35.根据权利要求34所述的装置，其中所述装置配置为通过在细胞的亚单位处记录至少一个拉曼光谱来测定转染。 36.根据权利要求35所述的装置，其中所述细胞的亚单位是细胞质、细胞膜区域、线粒体、空泡结构或微管组织中心(MTC)。 37.根据权利要求28-36中任一项所述的装置，其中所述装置配置为测定细胞或细胞组的转染率。 38.根据权利要求28-37中任一项所述的装置，其中所述装置配置为在活细胞或活细胞组或固定的细胞或固定的细胞组上进行转染的测定。 39.根据权利要求28-38中任一项所述的装置，其配置为进行权利要求1-27中任一项所述的方法。
所属类别：	发明专利