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原文传递用于脑中风的发光ELISA体外诊断试剂盒

专利名称：	用于脑中风的发光ELISA体外诊断试剂盒
摘要：	本发明提供一种用于发光ELISA的体液样品稳定化用水溶液以及包含该水溶液的用于脑中风的发光ELISA体外诊断试剂盒，所述体液样品中含有神经损伤标志性蛋白成分，在该体液样品稳定化用水溶液中，溶质包括人血清、动物血清白蛋白、无机碱金属盐、Tris碱、蛋白变性剂以及非离子型表面活性剂，该水溶液的pH值为6.7～7.6。在使用ELISA法从体液样品(例如，外周血液)中检测神经细胞损伤标志性蛋白成分NF‑H时，本发明体外诊断试剂盒的准确性和可重复性高，可以将体液中pg级别的NF‑H稳定而准确地检测出来，从而可以对脑中风患者的患病程度、治疗效果、预后等进行诊断。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	四川;51
申请人：	成都蓝瑙生物技术有限公司
发明人：	邓杰;丁维俊;夏巍
专利状态：	有效
申请日期：	2017-10-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201711007043.2
公开号：	CN109696549A
代理机构：	北京天昊联合知识产权代理有限公司
代理人：	丁业平;常海涛
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	610093 四川省成都市高新区天府大道中段177号
主权项：	1.一种用于发光酶联免疫吸附(ELISA)的体外诊断试剂盒，包括：体液样品稳定化用水溶液，所述体液样品中含有神经损伤标志性蛋白成分，在该体液样品稳定化用水溶液中，溶质包括人血清、动物血清白蛋白、无机碱金属盐、Tris碱、蛋白变性剂以及非离子型表面活性剂，该水溶液的pH值为6.7～7.6；以及，任选地包括的抗所述神经损伤标志性蛋白成分的抗体。 2.根据权利要求1所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述的抗所述神经损伤标志性蛋白成分的抗体为抗神经丝蛋白重链(NF-H)抗体，该抗NF-H抗体包括：捕捉抗体，和探测抗体；其中所述捕捉抗体和所述探测抗体为分别针对NF-H蛋白不同抗原表位的抗NF-H抗体，所述动物血清白蛋白来自牛、羊、马、兔、鸡，并且优选为牛血清白蛋白。 3.根据权利要求2所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述探测抗体上耦联有发光基团，所述发光基团的发光方式包括化学方式或者物理方式，所述化学方式优选包括酶催化或者化学发光，所述物理方式优选包括电致发光、荧光、以及荧光共振能量转移(FRET)中的任意一者。 4.根据权利要求2所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述捕捉抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，并且所述探测抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。 5.根据权利要求4所述的用于ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述多克隆抗体来自小鼠、兔、鸡、羊、豚鼠、驴、马中的任意一者。 6.根据权利要求2所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述人血清的浓度为10体积％～50体积％；所述牛血清白蛋白的浓度为0.1质量/体积％～10质量/体积％；所述无机碱金属盐的浓度为110mM～200mM；所述Tris碱的浓度为10mM～25mM；所述蛋白变性剂的浓度为0.01mM～0.5mM，以及所述非离子型表面活性剂的浓度为0.05体积％～5.0体积％。 7.根据权利要求1所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述无机碱金属盐选自碱金属盐酸盐；所述蛋白变性剂选自尿素和十二烷基硫酸钠中的至少一者；以及所述非离子型表面活性剂选自吐温-20，吐温-40，吐温-60，吐温-80和Triton X-100中的至少一者。 8.根据权利要求1所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述神经损伤标志性蛋白成分选自神经胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白(NFP)、神经丝蛋白重链(NF-H)、神经丝蛋白中链(NF-M)、神经丝蛋白轻链(NF-L)以及神经烯醇化酶中的至少一者。 9.根据权利要求1～8中任一项所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述体液为血液、血清、脑脊液、组织液、尿液、唾液或者汗液，优选为人外周血血清；更优选所述人外周血血清中含有NF-H作为所述神经损伤标志性蛋白成分；进一步更优选为每毫升所述人外周血血清中所含的NF-H为pg级水平；所述体外诊断试剂盒优选用于脑中风、出血性脑障碍、创伤性脑障碍、神经退行性疾病(阿尔茨海默病、脑血管性痴呆症、帕金森病、亨延顿氏舞蹈病、肌肉萎缩性轴突硬化症)的体外诊断。 10.根据权利要求9所述的用于发光ELISA的体外诊断试剂盒，其中，所述人外周血血清来自无症状志愿者、轻微症状的脑中风患者、脑中风急性期患者、脑中风恢复期患者、或脑中风后遗症期患者。
所属类别：	发明专利