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原文传递 用于脑中风的发光ELISA体液样品稳定化用水溶液
专利名称: 用于脑中风的发光ELISA体液样品稳定化用水溶液
摘要: 本发明提供一种用于发光ELISA的体液样品稳定化用水溶液,该体液样品中含有神经损伤标志性蛋白成分,在该体液样品稳定化用水溶液中,溶质包括人血清、动物血清白蛋白、无机碱金属盐、Tris碱、蛋白变性剂以及非离子型表面活性剂,该水溶液的pH值为6.7~7.6。在使用ELISA法从体液样品(例如,外周血液)中检测神经细胞损伤标志物蛋白成分NF‑H时,本发明的体液样品稳定化用水溶液能够有效降低体液样品中其它成分的干扰,提高检测结果的准确性和可重复性,并且可以将体液中pg级别的NF‑H稳定而准确地检测出来,从而可以对脑中风患者的患病程度、治疗效果、预后等进行诊断。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 四川;51
申请人: 成都蓝瑙生物技术有限公司
发明人: 邓杰;丁维俊;夏巍
专利状态: 有效
申请日期: 2017-10-25T00:00:00+0800
发布日期: 2019-04-30T00:00:00+0800
申请号: CN201711007044.7
公开号: CN109696550A
代理机构: 北京天昊联合知识产权代理有限公司
代理人: 丁业平;常海涛
分类号: G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 610093 四川省成都市高新区天府大道中段177号
主权项: 1.一种用于发光ELISA的体液样品稳定化用水溶液,所述体液样品中含有神经损伤标志性蛋白成分,在该体液样品稳定化用水溶液中,溶质包括人血清、动物血清白蛋白、无机碱金属盐、Tris碱、蛋白变性剂以及非离子型表面活性剂,该水溶液的pH值为6.7~7.6。 2.根据权利要求1所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述无机碱金属盐选自碱金属盐酸盐; 所述蛋白变性剂选自尿素和十二烷基硫酸钠中的至少一者; 所述非离子型表面活性剂选自吐温-20,吐温-40,吐温-60,吐温-80和Triton X-100中的至少一者, 所述动物血清白蛋白来自牛、羊、马、兔、鸡,并且优选为牛血清白蛋白。 3.根据权利要求1所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述神经损伤标志性蛋白成分选自神经胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白(NFP)、神经丝蛋白重链(NF-H)、神经丝蛋白中链(NF-M)、神经丝蛋白轻链(NF-L)以及神经烯醇化酶中的至少一者。 4.根据权利要求2所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述人血清的浓度为10体积%~50体积%; 所述牛血清白蛋白的浓度为0.1质量/体积%~10质量/体积%; 所述无机碱金属盐的浓度为110mM~200mM; 所述Tris碱的浓度为10mM~25mM; 所述蛋白变性剂的浓度为0.01mM~0.5mM,以及 所述非离子型表面活性剂的浓度为0.05体积%~5.0体积%。 5.根据权利要求4所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述无机碱金属盐为氯化钠和氯化钾,所述蛋白变性剂为尿素,所述非离子表面活性剂为吐温-20。 6.根据权利要求5所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述人血清的浓度为10体积%~35体积%; 所述牛血清白蛋白的浓度为0.5质量/体积%~5质量/体积%; 吐温-20的浓度为0.1体积%~3.0体积%; 尿素的浓度为0.05mM~0.25mM; 氯化钠的浓度为110mM~150mM; 氯化钾的浓度为2.0mM~3mM;以及 Tris碱的浓度为15mM~25mM。 7.根据权利要求6所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述氯化钠、氯化钾和所述Tris碱的至少一部分以Tris缓冲盐水的形式提供。 8.根据权利要求1~7中任一项所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述体液为血液、血清、脑脊液、组织液、尿液、唾液或者汗液,优选为人外周血血清;更优选所述人外周血血清中含有NF-H作为所述神经损伤标志性蛋白成分;进一步更优选为每毫升所述人外周血血清中所含的NF-H为pg级水平。 9.根据权利要求8所述的体液样品稳定化用水溶液,其中, 所述人外周血血清来自无症状志愿者、轻微症状的脑中风患者、脑中风急性期患者、脑中风恢复期患者、或脑中风后遗症期患者,并且 所述发光ELISA为双抗体夹心法ELISA。
所属类别: 发明专利
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