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原文传递一种抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法

专利名称：	一种抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法
摘要：	本发明公开了一种抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，包括如下步骤：先将抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原活化；然后，用包被缓冲液稀释包被抗原，将其加入酶标板中，在适宜环境中孵育2小时以上；接着，向每凹孔加入被检血清；接着，向每个凹孔中加入稀释缓冲液稀释的酶结合物，在37℃氛围中处理0.5‑1小时；最后，向每个凹孔中加入0.15ml的显色溶液，然后在37℃氛围中处理10‑30分钟，然后加入终止剂观察实验结果。本方法提升了检测方法的准确性，准确的对抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原进行定性的检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	镇江金太医学检验实验室有限公司
发明人：	陆上苏
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201811643155.1
公开号：	CN109738633A
分类号：	G01N33/535(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	212016 江苏省镇江市宗泽路60号恺源信息中心10楼
主权项：	1.一种抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，包括如下步骤：将抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原加入在PH=5-6.8的100mmol/L的活化液中，然后放置于40C环境中活化25分钟以上；用包被缓冲液稀释包被抗原至5-20ug/ml的浓度后，将其以每孔40-100ul的量加入酶标板中，在适宜环境中孵育2小时以上，然后清洗；向每凹孔加入用含有0.05%稀释缓冲液稀释的被检血清各0.2ml，在适宜环境中孵育1-2小时，然后清洗；向每个凹孔中加入稀释缓冲液稀释的酶结合物0.2ml，然后在37℃氛围中处理0.5-1小时，然后用清洗液清洗；向每个凹孔中加入0.15ml的显色溶液，然后在37℃氛围中处理10-30分钟，然后加入终止剂观察实验结果。 2.根据权利要求1所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，经经步骤c处理后的物质中先加入0.1-0.5ml的辅助溶剂后，在适宜温度处理1-3小时后再进行步骤d的操作。 3.根据权利要求2所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，所述辅助溶剂由以下按重量份数配比组成：酪蛋白钠1-2份，柠檬酸钠10-25份，庆大霉素0.1-0.3份，胱氨酸2-5份，牛血清白蛋白0.2-0.8份，0.2mol/L的KH2PO4溶液1-3份，加入适量去离子水调匀。 4.根据权利要求3所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，所述辅助溶剂由以下按重量份数配比组成：酪蛋白钠1份，柠檬酸钠15份，庆大霉素0.15份，胱氨酸3份，牛血清白蛋白0.3份， 0.2mol/L的KH2PO4溶液1份，加入适量去离子水调匀。 5.根据权利要求1所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原可以是纯化的天然抗原、重组抗原或者人工合成多肽。 6.根据权利要求1所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，所述活化液由以下按重量份数配比组成：甘油2-6份，维他命C 1-10份，黄原胶0.2-0.8份，透明质酸钠 0.1-0.2份。 7.根据权利要求1所述的抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗原检测方法，其特征在于，所述包被缓冲液选自50mM pH 9.6的碳酸盐缓冲液、20mM pH 8.5 的Tris-HCl或者10mM pH 7.2PBS溶液。
所属类别：	发明专利