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原文传递一种定量测定黄酮类化合物的方法

专利名称：	一种定量测定黄酮类化合物的方法
摘要：	一种定量测定黄酮类化合物的方法，属于纳米材料制备及化学分析检测技术领域。本发明利用自组装纳米化的四‑(4‑吡啶基)锌卟啉光敏效应和ZnCdSe量子点在缓冲溶液体系中制备得到一种具有双重复合纳米效应的可逆纳米卟啉荧光传感器；再利用黄酮类化合物与纳米卟啉间强作用力，将纳米卟啉与量子点间可逆复合传感界面拉开不同程度的特异性变化，从而实现黄酮类化合物的定量检测。本发明所涉及的制备方法简单可控且对黄酮类化合物检测方法灵敏度高、选择性好、特异性强，不仅能在黄酮类化合物检测中发挥重要作用，也可望在生物化学等领域具有重要的应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	中南民族大学
发明人：	付海燕;郭晓明;佘远斌
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910005406.1
公开号：	CN109738405A
代理机构：	北京思海天达知识产权代理有限公司
代理人：	张立改
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	430074 湖北省武汉市洪山区民族大道182号
主权项：	1.一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于，具体步骤如下： (1)将二氯化锌和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为9.7，然后加入二氯化镉充氮气冰浴搅拌5分钟。加入NaHSe，搅拌5分钟。最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟，得到ZnCdSe量子点； (2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉即ZnTPyP溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，超声溶解后置于4℃下备用；然后加入ZnTPyP的DMF溶液和十二烷基二甲基甜菜碱的水溶液室温下混合搅拌10min后得到一种非常稳定的绿色透明胶体四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒即纳米卟啉溶液； (3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体溶液加入ZnCdSe量子点荧光探针，再加入pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体通过电子转移和荧光共振能量转移作用，猝灭量子点荧光，通过特异性结合得到的复合物，提供量子点一个“Turn-off”的状态，荧光强度由840左右降至360左右；从而得到具有双重复合纳米效应的开关纳米卟啉荧光传感器； (4)将不同标准浓度的黄酮类化合物分别加入到相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，开关纳米卟啉荧光传感器中的量子点荧光恢复，不同浓度的黄酮类化合物致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异，实现了在可逆纳米卟啉荧光传感模式下黄酮类化合物的识别与定量；从而得到可逆“开-关-开”纳米卟啉荧光传感器；得到标准的现象，或直接将步骤(3)和(4)合并：分别将不同浓度范围的黄酮类化合物与步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液、pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液混合，静置5分钟；再加入步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱，得到标准的光谱； (5)将待测浓度的黄酮类化合物溶液加入到步骤(4)相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，或按照得到标准的光谱的步骤进行操作，将得到的现象或光谱对照步骤(4)即可得到浓度。 2.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：二氯化锌、N-乙酰-L-半胱氨酸、二氯化镉、NaHSe的物质的量的比为：1.0:3.0:0.01:0.1。 3.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤(1)ZnCdSe量子点荧光探针发射波长为465～480nm。 4.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十二烷基二甲基甜菜碱的物质的量比为1:14～16。 5.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒与ZnCdSe量子点溶液的物质的量比为277～280:1。 6.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤(3)最后混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒的浓度、ZnCdSe量子点浓度分别为0.84～5.04μmol/L、4.2×10-9mol/L。 7.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：黄酮类化合物选自槲皮素、芦丁、山奈酚、山奈素。 8.根据权利要求书1所述的一种定量测定黄酮类化合物的方法，其特征在于：用于检测离子、生物基质和混合溶液中的黄酮类化合物浓度。
所属类别：	发明专利