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原文传递一种定量测定茶碱和可可碱的方法

专利名称：	一种定量测定茶碱和可可碱的方法
摘要：	一种定量测定茶碱和可可碱的方法，属于纳米材料制备及化学分析检测技术领域。本发明利用自组装纳米化的四‑(4‑吡啶基)锌卟啉光敏效应和ZnCdSe量子点在缓冲溶液体系中制备得到一种具有双重复合纳米效应的可逆纳米卟啉荧光传感器；再利用茶碱、可可碱与纳米卟啉间强作用力，将纳米卟啉与量子点间可逆复合传感界面拉开不同程度的特异性变化，从而实现茶碱、可可碱的定量检测。本发明所涉及的制备方法简单可控且对可可碱、茶碱检测方法灵敏度高、选择性好、特异性强，不仅能在可可碱、茶碱检测中发挥重要作用，也可望在生物化学等领域具有重要的应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	中南民族大学
发明人：	付海燕;郭晓明;佘远斌;杨天鸣
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910005776.5
公开号：	CN109738407A
代理机构：	北京思海天达知识产权代理有限公司
代理人：	张立改
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	430074 湖北省武汉市洪山区民族大道182号
主权项：	1.一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于，具体步骤如下： (1)将二氯化锌和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为9.7，然后加入二氯化镉充氮气冰浴搅拌5分钟。加入NaHSe，搅拌5分钟。最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟，得到荧光ZnCdSe量子点； (2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中，在十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)水溶液中加入四-(4-吡啶基)锌卟啉N,N-二甲基甲酰胺溶液，常温、常压超声5min，70℃热水浴10min溶液由浑浊变澄清，反应停止(四-(4-吡啶基)锌卟啉N,N-二甲基甲酰胺溶液，得到棒状四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体即纳米卟啉溶液； (3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒自组装溶液加入到ZnCdSe量子点荧光探针中，再加入pH＝6.02的Tris-HCl缓冲溶液，四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒自组装溶液通过电子转移和荧光共振能量转移作用，部分或完全猝灭量子点荧光，通过特异性结合得到的复合物，提供量子点一个“Turn-off”的状态； (4)将不同标准浓度的可可碱和或茶碱加入步骤(3)得到的量子点荧光部分或完全猝灭的复合物中，量子点荧光恢复，不同标准浓度的可可碱或茶碱致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异，记录不同标准浓度的可可碱和或茶碱对应的量子点荧光恢复情况；或直接将步骤(3)和(4)合并：将不同浓度的可可碱和茶碱、步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液、pH＝6.02的Tris-HCl缓冲溶液混合，静置5分钟；再加入步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱；记录不同标准浓度的可可碱和或茶碱对应的量子点荧光恢复情况； (5)将待测浓度的可可碱和或茶碱加入到与步骤(4)相同的量子点荧光部分或完全猝灭的复合物中，结合步骤(4)浓度和量子点荧光恢复情况，从而得到待测物的浓度；实现了在可逆纳米卟啉荧光传感模式下可可碱和茶碱的识别与定量。 2.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：二氯化锌、N-乙酰-L-半胱氨酸、二氯化镉、NaHSe的物质的量的比例优选为：1.0:3.0:0.03:0.1。 3.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：ZnCdSe量子点荧光探针发射波长为460～480nm。 4.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十二烷基三甲基溴化铵的物质的量比为1:128～133。 5.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒与ZnCdSe量子点溶液的物质的量比为465～475:1。 6.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：步骤(3)最后的混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒的浓度、ZnCdSe量子点浓度分别为2.78×10-6～1.392×10-5mol/L、2.37 ×10-8mol/L。 7.按照权利要求1所述的一种定量测定茶碱和可可碱的方法，其特征在于：用于生物基质中茶碱和可可碱的微量检测。
所属类别：	发明专利