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原文传递微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法

专利名称：	微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法
摘要：	本发明涉及一种微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法，包括：步骤一：对玻璃片表面用BS3溶液进行处理，步骤二：在该表面键合有BS3的玻璃载体上进行ELISA实验，步骤一包括：使用丙酮、异丙醇和去离子水依次超声清洗玻璃片；用氮气吹干玻璃片后，对玻璃片表面进行plasma处理，再在玻璃片表面加入APTMS溶液，在室温下反应；将玻璃片清洗风干后，对该玻璃片加热，实现表面键合；恢复室温后在玻璃片表面加入BS3溶液，得到表面键合有BS3的玻璃载体。本发明提供的微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法，得到的固相载体检测区域面积小，对cTnI捕获均匀，检测精度高，能够为抗原抗体检测和药物筛选等领域提供有力的技术支持，可以很好地满足实际应用的需要。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏医联生物科技有限公司
发明人：	杨文婷;曹臻;陈亮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910046477.6
公开号：	CN109765358A
代理机构：	北京文苑专利代理有限公司
代理人：	朱青
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	225000 江苏省扬州市高新技术产业开发区开发西路217号
主权项：	1.一种微流控芯片应用蛋白质检测的化学处理方法，其特征在于，包括：步骤一：对玻璃片表面用BS3溶液进行处理。 2.根据权利要求1所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述方法还包括步骤二：在该表面键合有BS3的玻璃载体上进行ELISA实验。 3.根据权利要求1所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述步骤一包括：步骤1)使用丙酮、异丙醇和去离子水依次超声清洗玻璃片4～6min；步骤2)用氮气吹干玻璃片后，对玻璃片表面进行plasma处理，实现其表面羟基化，再在玻璃片表面加入浓度为8％～12％的APTMS溶液，在室温下反应13～17min；步骤3)将玻璃片清洗风干后，使用热板对该玻璃片在75～85℃范围内加热1.8～2.2h，实现表面键合；步骤4)恢复室温后在玻璃片表面加入4～6mM的BS3溶液，在室温下与表面已键合有APTMS的玻璃片表面反应23～27min，清洗后得到表面键合有BS3的玻璃载体。 4.根据权利要求1-3所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，在所述步骤2)中，对玻璃片表面进行plasma处理，打60W plasma85～95s，实现其表面羟基化。 5.根据权利要求2所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述步骤二包括：步骤(1)在该玻璃载体表面加入18～22μg/ml的cTnI单克隆抗体溶液室温下反应1.8～2.2h，实现cTnI捕获；步骤(2)清洗该玻璃载体后，再加入4～6％的BSA溶液室温下反应0.8～1.2h；步骤(3)清洗该玻璃载体后，再加入不同浓度cTnI溶液室温下反应1.8～2.2h；步骤(4)清洗该玻璃载体后，加入18～22μg/ml cTnI多克隆抗体溶液室温下反应1.8～2.2h；步骤(5)清洗该玻璃载体后，加入1.8～2.2μg/ml荧光标记的兔抗山羊IgG溶液室温下反应0.8～1.2h；步骤(6)清洗该玻璃载体后，在荧光显微镜下测得各浓度cTnI对应的荧光强度，得到荧光免疫曲线，并与未经过化学处理的干净玻璃片进行对比。 6.根据权利要求1-5所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，所述cTnI溶液的浓度取值范围为1pg/ml-1μg/ml。 7.根据权利要求3或5所述的微流控芯片应用蛋白质检测的处理方法，其特征在于，所述室温的温度范围为22℃～26℃。
所属类别：	发明专利