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原文传递一种单组份HRP底物（TMB）显色液的制备与配方

专利名称：	一种单组份HRP底物（TMB）显色液的制备与配方
摘要：	本发明公开了一种辣根过氧化物酶（HRP）底物显色液（单组份TMB溶液），所述组分还包含几种有机抗氧化剂抗坏血酸（VC），抗氧化肽等。可防止TMB溶液储存运输过程中被氧化导致体系不稳定而影响显色性能。本发明中的单组份TMB显色液可以稳定保存12个月以上，同时其显色性能与市售双组份TMB显色液相比更优。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉伊艾博科技有限公司
发明人：	徐世瑞;李学斌
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201811551871.7
公开号：	CN109765222A
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	430075 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1号楼A4栋3楼1号
主权项：	1.一种单组份TMB显色液，包含TMB，其特征在于，所述单组份TMB显色液还包含L-甲硫氨酸。 2.如权利要求1所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述L-甲硫氨酸在TMB显色液中的质量浓度为0.02～1g/L。 3.如权利要求2所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述L-甲硫氨酸在TMB显色液中的质量浓度为0.1～0.3g/L。 4.如权利要求1～3任一项所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述单组份TMB显色液还包含吐温80和羟丙基-β-环糊精。 5.如权利要求4所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述吐温-80在TMB显色液中的质量浓度为1～15g/L；所述羟丙基-β-环糊精在TMB显色液中的质量浓度为2～9g/L。 6.如权利要求5所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述吐温-80在TMB显色液中的质量浓度为4～10g/L；所述羟丙基-β-环糊精在TMB显色液中的质量浓度为2.5～5g/L。 7.如权利要求1-6任一项所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述TMB显色液还包含DMSO、磷酸氢二钠、柠檬酸和过氧化氢；所述DMSO在TMB显色液中的体积浓度为5～40ml/L；所述磷酸氢二钠在TMB显色液中的摩尔浓度为0.05-0.1mol/L；所述柠檬酸在TMB显色液中的摩尔浓度为0.03-0.05mol/L；所述过氧化氢在TMB显色液中的体积浓度为1-1.25ml/L；所述TMB在所述TMB显色液中的质量浓度为0.1-1g/L。 8.如权利要求7所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述DMSO在TMB显色液中的体积浓度为10～20ml/L；所述TMB在所述TMB显色液中的质量浓度为0.1-0.4g/L。 9.如权利要求1～8任一项所述的单组份TMB显色液，其特征在于，所述TMB显色液的pH为2.5-4.8。 10.一种如权利要求1～9所述单组份TMB显色液的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： (1)配制磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液：称取磷酸氢二钠、柠檬酸溶于去离子水中，用HCl调节pH至2.5～3.0，即得磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液； (2)称取吐温-80、羟丙基-β-环糊精和L-甲硫氨酸，边搅拌边将其加入到步骤(1)所得的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中，将其溶解直到溶液不再含有微小颗粒； (3)称取TMB，加入DMSO，使之充分溶解； (4)将步骤(3)所得的溶液加入步骤(2)所得的溶液中，充分搅拌，直到溶液不再含有微小颗粒； (5)在步骤(4)所得溶液的上液中加入过氧化氢，边加入边搅拌，使之充分溶解； (6)用稀盐酸调节pH至2.0-4.8，加纯水定容； (7)过滤获得均一的溶液，即为单组份TMB显色液。
所属类别：	发明专利