详情

原文传递一种免疫定量检测方法和应用

专利名称：	一种免疫定量检测方法和应用
摘要：	本发明公开了一种免疫定量检测方法，包括以下步骤：步骤S1、通过标准品和拮抗剂建立竞争指数‑浓度的标准曲线方程；步骤S2、检测样品的竞争指数，根据样品的竞争指数利用标准曲线方程来计算样品中待测抗原的浓度。本发明的免疫定量检测方法通引入特殊设计抗原(拮抗剂)把样本和标准品的免疫反应建立关联，再通过双色荧光反应把荧光强度数据处理成为竞争指数，建立剂量‑竞争指数的标准曲线来定量；采用竞争指数作为定量的反应关系，不仅解决了免疫反应条件差异的影响，又能使用存储的标准曲线进行定量，不用每次随样本做标准曲线，完美解决了免疫分析(包括免疫层析)准确定量与简单方便之间的矛盾。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	深圳大学
发明人：	买制刚
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910042577.1
公开号：	CN109781972A
代理机构：	深圳市顺天达专利商标代理有限公司
代理人：	郭伟刚
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	518000 广东省深圳市南山区科技园南区W2-A2
主权项：	1.一种免疫定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、通过标准品和拮抗剂建立竞争指数-浓度的标准曲线方程；步骤S2、检测样品的竞争指数，根据所述样品的竞争指数利用所述标准曲线方程来计算样品中待测抗原的浓度。 2.根据权利要求1所述的免疫定量检测方法，其特征在于，所述标准品中的抗原和所述样品中的待测抗原包含第一抗体识别位点和第二抗体识别位点，不含第三抗体识别位点；所述拮抗剂中的抗原包含第一抗体识别位点和第三抗体识别位点，不含第二抗体识别位点；使用第一荧光物质标记所述第二抗体，使用第二荧光物质标记所述第三抗体。 3.根据权利要求2所述的免疫定量检测方法，其特征在于，所述第三抗体可识别基因工程抗原标签蛋白，不能识别所述标准品中的抗原和所述样品中的待测抗原上的位点。 4.根据权利要求2所述的免疫定量检测方法，其特征在于，使用特异反应的结合物和配体来代替所述第三抗体及其抗原位点。 5.根据权利要求2所述的免疫定量检测方法，其特征在于，所述步骤S1包括：步骤S11、将所述标准品与所述拮抗剂的混合物与标记物液体反应，去除未反应的液体；步骤S12、检测所述第一荧光物质和所述第二荧光物质的荧光强度，计算竞争指数，所述竞争指数＝所述第一荧光物质的荧光强度/所述第二荧光物质的荧光强度；步骤S13、改变所述标准品的浓度，重复步骤S11和步骤S12，得到对应的竞争指数；步骤S14、利用标准品的浓度和对应的竞争指数绘制所述标准曲线方程。 6.根据权利要求5所述的免疫定量检测方法，其特征在于，所述步骤S2包括：步骤S21、将所述样品与所述拮抗剂的混合物与标记物液体反应，去除未反应的液体；步骤S22、检测所述第一荧光物质和所述第二荧光物质的荧光强度，计算竞争指数；步骤S23、根据所述样品的竞争指数和所述标准曲线方程来计算样品中待测抗原的浓度。 7.一种通过权利要求1-6所述的免疫定量检测方法在使用微孔板反应法定量检测血清中降钙素原中的应用。 8.一种通过权利要求1-6所述的免疫定量检测方法在使用免疫层析法定量检测血清中降钙素原中的应用。
所属类别：	发明专利