主权项: |
1.一种血液样品中的分析物的定量分析方法,所述方法为在用稀释用缓冲液稀释微量血液样品并对血液中的分析物进行定量分析的方法中包括使用外标物计算血液样品的稀释倍数,其中所述方法包括,外标物是在血液样品中恒定地以规定浓度含有的成分,所述稀释用缓冲液中不含有对外标物的定量产生干扰的成分,对用稀释用缓冲液稀释的血液样品中的外标物浓度进行测定,并根据它们的测定值计算血液样品的稀释倍数。 2.一种血液样品中的分析物的定量分析方法,所述方法包括对用稀释用缓冲液稀释的血液样品中的外标物浓度进行测定,并根据这些测定值计算血液样品的稀释倍数。 3.根据权利要求1或2所述的定量分析方法,其中,外标物选自由钠、氯、白蛋白和总蛋白构成的组。 4.根据权利要求3所述的定量分析方法,其中,外标物选自由钠、氯和总蛋白构成的组。 5.根据权利要求1~4中任一项所述的定量分析方法,其中,稀释用缓冲液含有选自由2-氨基-2-甲基-1-丙醇、2-乙基氨基乙醇、N-甲基-D-葡糖胺、二乙醇胺和三乙醇胺构成的组的氨基醇化合物,以及含有选自由HEPES即2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸、TES即N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、MOPS即3-吗啉丙磺酸和BES即N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸构成的组的缓冲剂作为缓冲液成分,且在pH6.5~8.0具有缓冲作用。 6.根据权利要求1~5中任一项所述的定量分析方法,其中,稀释用缓冲液实质上不含钠和氯。 7.根据权利要求1~6中任一项所述的定量分析方法,其中,微量血液样品的稀释倍数由下述计算式(I)的计算式进行计算,对稀释血浆中的分析物进行定量,乘以用计算式(I)求得的稀释倍数,从而对原血浆中的分析物进行定量: A:血浆中外标物浓度的正常人中位值的吸光度 B:稀释血浆中外标物的吸光度 X:血浆稀释倍数 其中,稀释血浆是指用稀释用缓冲液稀释血液样品并除去血细胞而得到的血浆。 8.根据权利要求3~7中任一项所述的定量分析方法,所述方法利用β-半乳糖苷酶的酶活性随钠离子浓度而变化,从而能够由β-半乳糖苷酶的吸光度变化量对钠离子浓度进行定量,用下述方法测定用稀释用缓冲液稀释的血液样品中的钠: 用稀释用缓冲液稀释生物样品,进一步用纯水稀释, 以样品量的10~30倍体积量添加含β-半乳糖苷酶的缓冲液即第一试剂,在30~45℃下加温2~20分钟,以第一试剂量的半量添加含邻硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷的底物溶液即第二试剂,在主波长410nm、副波长658nm处测定反应速度的吸光度。 9.一种缓冲液,所述缓冲液为在权利要求1~8中任一项所述的定量分析方法中用于稀释微量血液样品的稀释用缓冲液,所述缓冲液含有选自由2-氨基-2-甲基-1-丙醇、2-乙基氨基乙醇、N-甲基-D-葡糖胺、二乙醇胺和三乙醇胺构成的组的氨基醇化合物,以及含有选自由HEPES即2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸、TES即N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、MOPS即3-吗啉丙磺酸和BES即N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸构成的组的缓冲液作为缓冲剂成分,且在pH7.4具有缓冲作用。 10.根据权利要求9所述的缓冲液,所述缓冲液实质上不含钠和氯。 |