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原文传递一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法

专利名称：	一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法
摘要：	本发明提供了一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法，属于质谱成像技术领域。该成像方法包括以下步骤：将甜瓜组织冷冻后切片，将组织切片粘附在导电载玻片上，自然风干；采集风干的甜瓜组织切片的光学图像；将风干后的甜瓜组织切片蒸镀CHCA，再喷涂色谱级纯甲醇；将涂覆基质后的甜瓜组织切片激光解析电离；通过数据处理软件处理获得目标物质氯吡脲在甜瓜组织切片上相应质谱图像并与光学图像重合进行比较分析，得到氯吡脲在甜瓜组织中的空间分布情况。该方法快速简便，无需复杂前处理技术，将光学图像和质谱信息整合为一体，既观察到高分辨率的形态图像，又能对氯吡脲分子鉴定和可视化分布分析，为研究氯吡脲在甜瓜果实的空间分布提供新方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明人：	金芬;王琦;邵华;李春梅;王静;苏杭
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910162994.X
公开号：	CN109813796A
代理机构：	北京高沃律师事务所
代理人：	刘奇
分类号：	G01N27/62(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	100000 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)将氯吡脲溶液处理的甜瓜组织和未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织分别进行冷冻切片，将得到的两种组织切片转移至导电载玻片上，自然风干； 2)将步骤1)中两种风干后的甜瓜组织切片分别用带有激光的成像质谱仪采集光学图像，得到施药组甜瓜组织切片光学图像和空白对照组甜瓜组织切片光学图像； 3)将步骤1)中两种风干后的甜瓜组织切片分别蒸镀α-氰基-4-羟基肉桂酸，再喷涂色谱级纯甲醇，得到施药组涂覆基质的甜瓜组织切片和空白对照组涂覆基质的甜瓜组织切片； 4)将步骤3)中所述施药组涂覆基质的甜瓜组织切片和空白对照组涂覆基质的甜瓜组织切片在质谱仪中进行激光解析电离，得到施药组甜瓜组织切片质谱图像和空白对照组甜瓜组织切片质谱图像； 5)通过数据处理软件处理获得氯吡脲在施药组甜瓜组织切片上相应质谱图像，并与步骤2)中所述施药组甜瓜组织切片光学图像重合比较分析，根据空白对照组甜瓜组织质谱图像与光学图像重合比较分析结果，去除甜瓜组织自身基质干扰，得到氯吡脲在甜瓜组织中的空间分布情况。 2.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤4)中所述激光解析电离包括一级质谱和二级质谱；所述一级质谱的条件如下：测定模式为正离子模式，质荷比扫描范围为200～300，激光能量为45Hz，激光径为25μm；所述二级质谱的条件如下：测定模式为正离子模式，前体离子为248.05，质荷比扫描范围为50～300，激光能量为51Hz，激光径为25μm。 3.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤3)中蒸镀α-氰基-4-羟基肉桂酸的时间为20min。 4.根据权利要求1或3所述的成像方法，其特征在于，步骤3)中喷涂色谱级纯甲醇的体积为1mL/导电载玻片。 5.根据权利要求1所述成像方法，其特征在于，步骤1)中所述冷冻切片前，将氯吡脲溶液处理的甜瓜组织和未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织分别置于液氮中冷冻。 6.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述切片采用冷冻切片机进行；所述冷冻切片机的温度设置为-18℃。 7.根据权利要求1、5和6中任意一项所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述切片时每次切片的厚度为35μm。 8.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，所述氯吡脲溶液处理的甜瓜组织是将甜瓜幼果开花当日用氯吡脲溶液处理，处理后2h摘取获得。 9.根据权利要求1或8所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述氯吡脲溶液的浓度为20mg/L；所述氯吡脲溶液处理的时间为3～5s。 10.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，所述未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织是甜瓜幼果开花后当天进行人工授粉，授粉后2h摘取获得。
所属类别：	发明专利