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原文传递基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法

专利名称：	基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法
摘要：	本发明提出一种基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，包括：1)对超高温灭菌乳样品和复原乳样品进行提脂预处理，得到脂质样品；2)采用高分辨质谱技术，对超高温灭菌乳和复原乳的脂质样品进行色谱分离‑质谱扫描；3)对两种乳的脂质样品的峰进行提取、过滤，对各脂质成分进行定性分析，并对各脂质成分进行积分处理；4)将积分结果进行正交偏最小二乘方差判别分析，确定出可将两种类型乳完全分类的表征因子；5)利用筛选出的表征因子建立正交偏最小二乘方差判别模型。本发明采用高分辨质谱仪进行测定，前处理方法简单，易操作，且可对两种乳中物质的种类和含量进行全面分析，实现样品的在线自动化检测，极大提高了样品的检测效率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明人：	陈刚;崔婧;朱丹;苏美丞;谭冬飞;贾曼
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910047108.9
公开号：	CN109813813A
代理机构：	北京路浩知识产权代理有限公司
代理人：	王文君;王文红
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100081 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，包括步骤： 1)对超高温灭菌乳样品和复原乳样品进行提脂预处理，得到脂质样品； 2)采用高分辨质谱技术，分别对超高温灭菌乳和复原乳的脂质样品进行色谱分离-质谱扫描，包括一级扫描和二级离子碎片扫描； 3)对两种乳的脂质样品的峰进行提取、过滤，对各脂质成分进行定性分析，并对各脂质成分峰面积进行积分处理； 4)将积分结果进行正交偏最小二乘方差判别分析，确定出可将两种类型乳完全分类的表征因子； 5)利用筛选出的表征因子建立正交偏最小二乘方差判别模型，以区分超高温灭菌乳和复原乳。 2.根据权利要求1所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，所述复原乳样品是用全脂奶粉，按照蛋白质含量为3.0g/100mL配制而得。 3.根据权利要求1所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，所述提脂预处理为：向1体积份的超高温灭菌乳或复原乳的样品中加3～8体积份的水，涡旋；再加入10～20体积份的CHCl3和MeOH混合溶液，涡旋、离心；取下层溶液进行氮吹；用5～15体积份的CHCl3和MeOH混合溶液复溶。 4.根据权利要求3所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，所述CHCl3和MeOH混合溶液中CHCl3:MeOH的体积比为(2～3):1；所述CHCl3和MeOH混合溶液中CHCl3:MeOH的体积比为(2～3):1。 5.根据权利要求1所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，所述色谱分离的条件为：采用的流动相A为含1～50mmol/L乙酸铵的乙腈水溶液，流动相B为含1～50mmol/L乙酸铵的异丙醇乙腈溶液。 6.根据权利要求5所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，洗脱梯度为: 7.根据权利要求1所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，质谱的条件为：正离子模式喷雾电压3.2kV，离子源温度320℃，鞘气流速35Arb,辅助气体流速10Arb；负离子模式喷雾电压2.8kV，离子源温度320℃，鞘气流速35Arb,辅助气体流速10Arb。 8.根据权利要求1～7任一项所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，对两种模式下判别分析的VIP值进行分析，正离子模式下，提取VIP>1.5的脂质成分作为区别两种乳的表征因子；利用单因素方差法分析各表征因子的方差显著性。 9.根据权利要求1～7任一项所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，对两种模式下判别分析的VIP值进行分析，负离子模式下，提取VIP>1.3的脂质成分作为区别两种乳的表征因子，利用单因素方差法分析各表征因子的方差显著性。 10.根据权利要求1～7任一项所述的基于脂质组鉴别超高温灭菌乳与复原乳的方法，其特征在于，还包括操作：用色谱分离-质谱扫描未知乳样的脂质样品，基于所述正交偏最小二乘方差判别模型，对未知乳样进行鉴别；积分数值落在超高温灭菌乳区域内的判定为超高温灭菌乳，落在复原乳区域内的判定为复原乳。
所属类别：	发明专利