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原文传递液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法及应用

专利名称：	液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法及应用
摘要：	本发明提供了一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，该方法为制备混标溶液和供试中药溶液，用液相色谱和质谱联用技术进样测定，通过将精确分子量、保留时间与混标溶液中的化学成分对照，实现中药提取液中相应化学成分的定性及含量测定，还提供了上述方法的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8‑姜酚和10‑姜酚中的一种或一种以上的含量。本发明能够实现中药中含有上述10种化学成分中一种或以上成分的同时检测定量，测定方法快速、高效、灵敏度高且测定方法简单易行，为中药的质量控制提供方法学依据。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	齐齐哈尔大学
发明人：	辛杨
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
申请号：	CN201910247996.9
公开号：	CN109828066A
代理机构：	西安汇恩知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	张伟花
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	161006 黑龙江省齐齐哈尔市文化大街42号
主权项：	1.一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： S1、混标溶液的制备：分别称取苯甲酰乌头原碱标准品、苯甲酰新乌头原碱标准品、白术内酯I标准品、白术内酯II标准品、白术内酯III标准品、党参炔苷标准品、甘草苷标准品、甘草素标准品、8-姜酚标准品和10-姜酚标准品，分别加无水乙醇溶解定容，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液； S2、供试中药溶液的制备：将中药加入蒸馏水浸泡后，回流提取2次，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解，定容后，得到供试中药溶液； S3、测定：将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样： S301、液相色谱条件：采用反向高效液相色谱进行分离，仪器型号为Dionex UltiMate 3000 UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的Hypersil Gold C18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6min时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min； S302、质谱条件：以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-Obitriap MS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V； S4、判断：设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内。 2.一种如权利要求1所述液相色谱串联质谱测定中药化学成分的方法的应用，其特征在于，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的含量。 3.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述浸泡的时间为30min～40min。 4.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述回流提取中第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min。 5.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述超声溶解的时间为5min～10min。 6.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述中药和蒸馏水的质量和体积比为1g:(8～20)mL。 7.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S4中所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量质量色谱峰保留时间与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％。
所属类别：	发明专利