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原文传递 用于检测犬癌的装置及方法
专利名称: 用于检测犬癌的装置及方法
摘要: 发现在患有癌症的犬中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A(ECPKA)蛋白以高水平分泌,并形成对犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A蛋白的自身抗体。还发现人细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A不能选择性地与犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A自身抗体相结合,且不能充当生物标志物。并且,犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A自身抗体检测仅在采用这种抗体的定量测定的情况下可用作对犬的癌症的有意义的诊断工具。在犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A自身抗体的测定不确定的情况下,测定C反应蛋白(CRP)可提供补充数据,其可用于提高以下进一步描述的测定犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A自身抗体的预测可能性。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 韩国;KR
申请人: 房东河
发明人: 房东河
专利状态: 有效
申请日期: 2017-10-10T00:00:00+0800
发布日期: 2019-06-04T00:00:00+0800
申请号: CN201780062574.3
公开号: CN109844531A
代理机构: 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 王建国;李琳
分类号: G01N33/558(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 韩国首尔
主权项: 1.一种侧向流动试剂盒,用于定量检测犬血中的犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体,其特征在于, 包括: 第一固相,具有固定的纯化的具有包含序列5的氨基酸序列的重组犬PKC Cα蛋白; 接合垫,包含与第一结合蛋白接合而成的具有光学密度的接合的着色剂;以及 第二固相,包含第二结合蛋白, 上述接合的着色剂在第一固相中提供第一颜色强度,在第二固相中提供第二颜色强度, 第一颜色强度以定量的方式依赖于犬血中抗体的浓度,第二颜色强度与抗体的浓度无关。 2.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述接合的着色剂的光学密度为5至30。 3.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述接合的着色剂的光学密度为10至20。 4.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述侧向流动试剂盒以至少80%的特异性和至少80%的灵敏度从犬中检测癌症。 5.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述第一颜色强度通过对第一颜色强度与第一颜色强度和抗体的浓度间的相关数据集进行比较来提供抗体的浓度。 6.根据权利要求5所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,相关数据集的一部分能够通过线性方程来近似地表示,并且在第一颜色强度与任何相关数据集都不完全一致时其能够用于确定浓度。 7.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述第一结合蛋白选自由能够与链亲和素、生物素、蛋白A、抗-犬免疫球蛋白G大鼠、抗-犬免疫球蛋白G兔子、抗-犬免疫球蛋白G山羊、抗-犬免疫球蛋白G羊及抗体相结合的蛋白质组成的组中。 8.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述第二结合蛋白选自由能够与链亲和素、生物素、蛋白A、抗-大鼠免疫球蛋白G、抗-兔子免疫球蛋白G、抗-山羊免疫球蛋白G、抗-羊免疫球蛋白G及免疫球蛋白G相结合的蛋白质组成的组中。 9.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,上述着色剂选自由金、乳胶、绿色荧光蛋白、异硫氰酸荧光素及紫外线活性接合剂组成的组中。 10.根据权利要求1所述的侧向流动试剂盒,其特征在于,还包含用于过滤血球的过滤相。 11.一种用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于, 包括: 步骤(a),为了使用于侧向流动试剂盒,从犬血液中制备检查样品; 步骤(b),将检查样品适用于侧向流动试剂盒; 步骤(c),使侧向流动试剂盒显色; 步骤(d),通过拍摄包括检查线的已显色的侧向流动试剂盒的数字照片来获得数字信息;以及 步骤(e),作为获得抗体的浓度的步骤,通过对使数字值与抗体的浓度相关的数据集与数字信息进行比较来确定上述浓度, 上述侧向流动试剂盒包括: 第一固相,具有固定的纯化的具有包含序列5的氨基酸序列的重组犬PKC Cα蛋白; 接合垫,包含与第一结合蛋白接合而成的具有光学密度的接合的着色剂;以及 第二固相,包含第二结合蛋白, 上述接合的着色剂在第一固相中提供第一颜色强度,在第二固相中提供第二颜色强度, 上述第一颜色强度以定量的方式依赖于犬血中抗体的浓度,上述第二颜色强度与抗体的浓度无关。 12.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,还包括确定犬患癌的可能性的步骤。 13.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,还包括通过无线通信将数字信息传输到外部服务器的步骤。 14.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,获得上述数字信息的步骤通过使用包括以收容无线通信模块、摄像头模块、光源及侧向流动试剂盒的方式设计的插槽的读取盒来实施。 15.根据权利要求14所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,上述无线通信模块基于短程无线通信协议进行工作。 16.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,光学密度高于5。 17.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,光学密度高于10。 18.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,上述方法以至少80%的特异性和至少80%的灵敏度从犬中检测癌症。 19.根据权利要求11所述的用于确定犬血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于,通过使用R2值大于0.9的线性方程来估算上述抗体的浓度。 20.一种用于确定哺乳动物血中犬细胞外环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A抗体的浓度的方法,其特征在于, 包括: 步骤(a),为了使用于侧向流动试剂盒,从哺乳动物的血液中制备检查样品; 步骤(b),将上述检查样品适用于侧向流动试剂盒; 步骤(c),使侧向流动试剂盒显色; 步骤(d),通过拍摄显色的侧向流动试剂盒的数字照片来获得数字信息;以及 步骤(e),作为获得抗体的浓度的步骤,通过对使从数字照片中获得的数字值与抗体的浓度相关的数据集与检查线的数字信息进行比较来测定上述浓度, 上述侧向流动试剂盒包括: 第一固相,具有固定的纯化的具有氨基酸序列的重组犬PKC Cα蛋白; 接合垫,包含与第一结合蛋白接合而成的具有5以上的光学密度的接合的着色剂;以及 第二固相,包含第二结合蛋白, 上述接合的着色剂在第一固相中提供第一颜色强度,在第二固相中提供第二颜色强度, 上述第一颜色强度以定量的方式依赖于犬血中抗体的浓度,上述第二颜色强度与抗体的浓度无关。
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