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原文传递一种利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法

专利名称：	一种利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法
摘要：	本发明公开了一种利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，本发明的检测多种抗生素的方法所用的检测时间大大缩短，可同步检索出十种抗生素，其中包括磺胺类抗生素、β‑内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素。简化了检测工艺、降低了检测成本同时提高了检测效率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北工程大学
发明人：	李清雪;孙王茹;刘含雨;付超;王玉冰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910080673.5
公开号：	CN109856268A
代理机构：	北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	李兴林
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	056000 河北省邯郸市邯山区光明南大街199号
主权项：	1.一种利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述抗生素包括磺胺类抗生素、β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素，该方法包括以下步骤： (1)首先选取待测水样； (2)将待测水样进行过滤，然后加入Na2-EDTA，并调节pH值至3； (3)在活化后的HLB小柱中通入步骤(2)处理后的待测水样，对待测水样进行富集； (4)利用洗脱剂对富集后的HLB小柱进行洗脱，得到洗脱液，将洗脱液进行浓缩，得到浓缩液； (5)将浓缩液用甲醇定容至1mL，移取稀释后的待测水样，利用高效液相色谱进行检测抗生素，所述高效液相色谱采用Shim-pack GIST C18的色谱柱，柱温为40℃，进样体积为30μL，其中高效液相色谱仪采用的流动相为以浓度为0.1％的甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，以乙腈为流动相C，采用梯度洗脱方式，流动相的流速为0.8mL/min； (6)计算出水样中抗生素对应的峰面积，根据标准曲线定量计算，得出水样中多种抗生素的含量。 2.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用孔径为0.45μm滤膜过滤水样，且Na2-EDTA的加入量为0.5g/L。 3.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用4mol/L的盐酸调节水样的pH。 4.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述步骤(3)HLB小柱的活化方法为依次用5mL甲醇，5mL质量浓度为0.1％甲酸水溶液通过HLB小柱进行活化处理。 5.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述步骤(3)待测水样通过HLB小柱的速度为5mL/min 6.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，步骤(4)对富集后的HLB小柱进行洗脱具体为：首选使用6mL质量浓度为5％的甲醇水溶液对富集后的HLB小柱进行淋洗，真空干燥20min后再使用6mL甲醇进行淋洗。 7.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，步骤(4)中洗脱液的浓缩方法为自然吹风至近干。 8.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述磺胺类抗生素为甲氧苄啶、磺胺嘧啶，磺胺甲恶唑，β-内酰胺类抗生素为头孢克洛，头孢克肟，头孢唑林，喹诺酮类抗生素为氟罗沙星，诺氟沙星，环丙沙星，洛美沙星。 9.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，步骤(5)流动相的梯度洗脱方式为：0-6min，流动相A与流动相B、流动相C的体积比为8:1:1；6-8min，流动相A与流动相B、流动相C的体积比为13:5:2；8-9min，流动相A与流动相B、流动相C的体积比为6:3:1；9-13min，流动相A与流动相B、流动相C的体积比为5:4:1；13-14min，流动相A与流动相B、流动相C的体积比为8:1:1。 10.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的检测波长为270nm。
所属类别：	发明专利