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原文传递基于LC-MS技术同时测定中药制剂中多种成分含量的方法

专利名称：	基于LC-MS技术同时测定中药制剂中多种成分含量的方法
摘要：	本发明涉及一种中药制剂的多种成分含量同时测定的方法，具体采用液相色谱‑质谱联用(LC‑MS)技术，结合多反应监测(MRM)，建立了天龙通络胶囊中多种成分含量的同时测定方法。该方法能快速、有效地对天龙通络胶囊中31种成分的含量进行同时测定，方法准确、灵敏度高、专属性强、重现性好，有利于提高天龙通络胶囊的质量控制水平，保障产品质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	牡丹江友搏药业有限责任公司
发明人：	李振国;陈艳明;郑顺亮;王思瑶;李萍;杨华
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910062453.X
公开号：	CN109856267A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	157013 黑龙江省牡丹江市阳明区裕民路288号
主权项：	1.一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，建立LC-MS(MRM)分离和同时含量测定方法，测定天龙通络胶囊中31种主要成分，该质量控制技术包括如下步骤： (1)对天龙通络胶囊进行提取； (2)将天龙通络胶囊样品溶液进行高效液相色谱(HPLC)分离； (3)质谱(MS)并结合多反应监测(MRM)进行检测分析和31种成分的含量测定，其中31种成分及MS-MRM参数如下： 2.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(1)对天龙通络胶囊提取可以采用中药制剂样品溶液的常规提取方式：包括但不限于加热提取、超声提取、索氏提取等，优选超声提取；提取溶剂类型包括但不限于甲醇、乙醇、水、不同比例的甲醇-水和不同比例的乙醇-水等；料液比、提取温度、提取时间等可根据具体待测样品进行考察优化。 3.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(2)将天龙通络胶囊样品溶液进行高效液相色谱(HPLC)分离，样品溶液可采用高速离心或滤膜过滤等方式进行样品进样前处理。 4.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(2)将天龙通络胶囊样品溶液进行高效液相色谱(HPLC)分离，色谱柱采用C18为固定相；流动相包含且不限于甲醇、乙腈，不同浓度的含酸、或含碱、或含缓冲盐等水溶液；柱温、流速、进样体积、流动相组成及梯度洗脱条件根据所用的色谱柱可适当调整。 5.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述的进行质谱(MS)并结合多反应监测(MRM)进行检测分析，其优化的质谱条件为：雾化压力35psig；毛细管电压，3500V；干燥气体流速：10L/min；干燥气体温度：350℃；定量采用多重反应监测(MRM)模式，监测化合物从母离子到某一特定子离子的裂解过程。 6.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述的多种成分的含量测定，选用合适的内标物作为内标，以进行多成分含量的同时、准确测定。 7.根据权利要求2所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，天龙通络胶囊的提取条件优选为50％乙醇-水超声提取30min，提取温度20℃，料液比1∶320。 8.根据权利要求4所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，液相(HPLC)条件，优选为流动相A为0.1％甲酸-水(v/v)，流动相B相为乙腈，柱温25℃，流速为1.0mL/min，进样体积为5μL，梯度洗脱条件：0～5min，B为5％；5～13min，B为5％→7％；13～20min，B为7％→10％；20～30min，B为10％→22％；30～35min，B为22％→23％；35～41min，B为23％→24％；41～46min，B为24％→27％；46～59min，B为27％→60％；59～62min，B为60％→80％；62～70min，B为80％→100％；70～75min，B为100％。 9.根据权利要求6所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，所述的内标化合物更进一步优化，选择化合物性质稳定且出峰位置合适的的甘草次酸和岩白菜素作为内标化合物，以满足制剂中不同类型成分的准确定量；优选内标化合物的终浓度均为83.33μg/mL。 10.根据权利要求6所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，以甘草次酸为内标，定量7个胆酸类化合物(牛磺胆酸，甘氨胆酸，胆酸，熊去氧胆酸，鹅去氧胆酸，甘氨脱氧胆酸和去氧胆酸)；以岩白菜素为内标，定量其余24个化合物(水苏糖，牛磺酸，苹果酸，琥珀酸，天麻素，L-苯丙氨酸，丹参素，原儿茶酸，L-色氨酸，3，4-二羟基苯甲醛，4-羟基苯甲酸，巴利森苷E，绿原酸，香草酸，咖啡酸，4-羟基苯甲醛，巴利森苷B，阿魏酸，异绿原酸A，异绿原酸C，迷迭香酸，紫草酸，丹酚酸B，丹酚酸A)。
所属类别：	发明专利