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原文传递一种检测久效磷的时间分辨荧光试纸条及其应用

专利名称：	一种检测久效磷的时间分辨荧光试纸条及其应用
摘要：	本发明公开了一种检测久效磷的时间分辨荧光试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫，反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端；样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有久效磷时间时间分辨荧光微球；反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被久效磷抗原(包被原)，C线包被抗兔抗体。本发明还提供了一种应用上述久效磷试纸条检测苹果、玉米、黄瓜、西红柿、萝卜叶、白菜等样品中久效磷残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、定量检测、快速检测、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北方工业大学
发明人：	闫江;王晓磊
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201810217515.5
公开号：	CN109856091A
代理机构：	北京金咨知识产权代理有限公司
代理人：	宋教花
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	100144 北京市石景山区晋元庄路5号
主权项：	1.一种检测久效磷的时间分辨荧光试纸条，包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫，其特征在于所述反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端；所述样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有久效磷时间时间分辨荧光微球；所述反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被久效磷抗原(包被原)，C线包被抗兔抗体，所述久效磷抗原是久效磷半抗原-载体蛋白偶联物，所述久效磷半抗原的制备方法如下：将1g三乙胺溶于20ml DMF中，室温搅拌，加入久效磷2.2g，溶解后加入1.2g丁二酸酐，搅拌10h，加入100ml去离子水，100ml×3次乙酸乙酯萃取，合并有机相，减压去溶剂，柱层析纯化，得到目标物2.7g，收率83％。 2.如权利要求1所述的检测久效磷的时间分辨荧光试纸条，其特征在于所述久效磷半抗原的分子结构式为： 3.如权利要求1所述的检测久效磷的时间分辨荧光试纸条，其特征在于所述久效磷时间分辨荧光微球，包括检测微球和质控微球，检测微球为表面包被有久效磷单克隆抗体的荧光微球，质控微球为表面包被有兔抗标记蛋白的荧光微球。 4.如权利要求1所述的检测久效磷的时间分辨荧光试纸条，久效磷单克隆抗体是以久效磷半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述免疫原的制备方法如下：将133mg BSA溶于5ml 0.01M PBS，搅拌溶解；久效磷半抗原与BSA比例可在1∶1～60∶1的范围内调整，本申请选择在加入22mg久效磷半抗原(与BSA摩尔比为50∶1)，加入EDC盐酸盐10mg，室温搅拌6h；移入透析袋中透析48h。 5.如权利要求1所述的检测久效磷的时间分辨荧光试纸条，所述包被原的制备方法如下：将86mg OVA溶于5ml 0.01M PBS，搅拌溶解；久效磷半抗原与OVA比例可在1∶1～40∶1的范围内调整，本申请选择在加入17.6mg久效磷半抗原(与OVA摩尔比为40∶1)，加入EDC盐酸盐10mg，室温搅拌6h；移入透析袋中透析48h。 6.一种制备权利要求1-5任一项所述试纸条的方法，其包括步骤： 1)制备喷涂有久效磷单克隆抗体-时间分辨荧光标记物的样品吸收垫； 2)制备具有包被有久效磷半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有抗兔抗体的质控线的反应膜； 3)将1)和2)制备好的样品吸收垫、反应膜以及吸水垫组装成试纸条。 7.一种检测苹果、玉米、黄瓜、西红柿、萝卜叶、白菜等样品中久效磷残留的方法，其包括步骤： 1)样本前处理； 2)用权利要求1-6任一项所述的试纸条进行检测； 3)分析检测结果。
所属类别：	发明专利