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原文传递一种氯乙酰肼的检测方法和一种检测磷酸西格列汀中氯乙酰肼的方法

专利名称：	一种氯乙酰肼的检测方法和一种检测磷酸西格列汀中氯乙酰肼的方法
摘要：	本发明提供一种基于亲水作用高效液相色谱法的氯乙酰肼的检测方法，色谱条件为：色谱柱：HILIC色谱柱；检测器：紫外检测器；流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸水溶液为B相，等度洗脱，两相的体积比为：A∶B＝78～82％∶18～22％；流速：0.7ml/min～1.4ml/min；柱温：35℃～45℃；进样量：5ul。该检测方法的最低线性检出浓度为0.17μg/ml，以信噪比3:1确定方法的最低检出浓度为0.05μg/ml。本发明还提供上述检测方法在磷酸西格列汀杂质检测中的应用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	通化东宝药业股份有限公司
发明人：	冷春生;宁科权;王广祁;王健;盛永强
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201910170132.1
公开号：	CN109884203A
代理机构：	北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	李琰
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	134123 吉林省通化市通化县东宝新村
主权项：	1.一种氯乙酰肼的检测方法，所述方法基于亲水作用高效液相法，色谱条件为：色谱柱：HILIC色谱柱；检测器：紫外检测器；检测波长：204nm～210nm；流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸水溶液为B相，等度洗脱，两相的体积比为：A∶B＝78～82％∶18～22％；流速：0.7ml/min～1.4ml/min；柱温：35℃～45℃；进样量：5ul。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为Waters HILIC色谱柱，规格250mm4.6mm，5μm。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述检测波长为207nm。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中，所述两相的体积比为A∶B＝80％：20％；优选地，所述流速为1.0ml/min～1.1ml/min。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述柱温为40～42℃。 6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，对照品溶液用超纯水配制；优选地，对照品溶液的制备方法为：精密量取氯乙酰肼盐酸盐适量，用超纯水溶解并稀释成每1ml含0.1～10μg氯乙酰肼的溶液，即得。 7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括定性检测和/或定量测定，具体步骤包括：定性检测：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液5μl，注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％～20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别进样，注入液相色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；和/或定量测定：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液5μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％～20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别进样，注入离子色谱仪，按外标法计算供试品溶液中氯乙酰肼的含量。 8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，最低线性检出浓度为0.17μg/ml，以信噪比3:1计算最低检出浓度为0.05μg/ml。 9.权利要求1至8中任一项所述的检测方法在磷酸西格列汀杂质定性和/或定量检测中的应用，所述杂质为氯乙酰肼。 10.一种磷酸西格列汀中的氯乙酰肼的检测方法，包括色谱条件建立、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、定性检测和/或定量测定，其中，色谱条件的建立：色谱柱：Waters HILIIC色谱柱，规格250mm4.6mm，5μm；检测器：紫外检测器；检测波长：204nm～210nm，优选207nm 流动相：乙腈为A相，0.1％磷酸水溶液为B相，等度洗脱，两相的体积比为：A∶B＝78～82％∶18～22％，优选A∶B＝80％∶20％；流速：0.8ml/min～1.3ml/min，优选1.1ml/min；柱温：35℃～45℃，优选40℃～42℃；进样量：5μl；对照品溶液的制备：精密量取氯乙酰肼盐酸盐适量，用超纯水溶解并稀释成每1ml含0.9±0.09μg氯乙酰肼的溶液，即得；供试品溶液的制备：取磷酸西格列汀适量，用超纯水溶解并稀释制成每1ml含60±6mg磷酸西格列汀的溶液，即得；定性检测：在所述色谱条件下，精密量取所述对照品溶液5μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％～20％；再精密量取所述供试品溶液和所述对照品溶液各5μl，分别进样，注入液相色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；和/或定量测定：在所述色谱条件下，精密量取所述对照品溶液5μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％～20％；再精密量取所述供试品溶液和所述对照品溶液各5μl，分别进样，注入液相色谱仪，按外标法计算供试品溶液中氯乙酰肼的含量。
所属类别：	发明专利