详情

原文传递姜黄素的高效液相检测方法

专利名称：	姜黄素的高效液相检测方法
摘要：	本发明公开一种姜黄素的高效液相检测方法，采用反相C18色谱柱、PDA检测器，流动相A是甲酸‑醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，流动相B是甲酸‑醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，采用梯度洗脱。本方法进样3～5ul，能够有效检出姜黄素及其有关物质，并且分离度R能达1.5以上，分离效果好，HPLC谱基线平稳，不发生漂移；本方法检测时间短，只需3min即可完成高效液相检测过程，大大提高了检测效率，适合高通量筛选；能节省溶剂，降低成本，操作安全简易，处理方便快捷；用于姜黄素的含量测定，具有良好的线性关系，重现性高，精确度和准确度高，在原料药、制剂质量研究以及相关药动学定量研究等方面具有重要研究价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海药明康德新药开发有限公司
发明人：	叶洪幸;汤城
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-01T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201910155831.9
公开号：	CN109884236A
代理机构：	上海浦一知识产权代理有限公司
代理人：	郑权
分类号：	G01N30/89(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200131 上海市浦东新区富特中路288号1号楼
主权项：	1.一种姜黄素的高效液相检测方法，其特征在于，采用色谱条件如下：色谱柱采用反相C18色谱柱；检测器采用PDA检测器；流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，水溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，水溶液与乙腈的体积比为100～95：0～5；流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，乙腈溶液与水的体积比为100～95：0～5；采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：流动相A+流动相B＝100％，0～0.01min，流动相B保持体积百分比为50％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由50％递增至60％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由60％递减至50％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为50％。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的体积分数为95：5的混合溶液，流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的体积分数为95：5的混合溶液。 3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流动相A中，水溶液中甲酸体积浓度为0.025％；所述流动相B中，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.025％。 4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流动相A中，水溶液中醋酸铵浓度为1mM；所述流动相B中，乙腈溶液中醋酸铵浓度为1mM。 5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为100mm。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，流速为1.0～2.0ml/min。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，检测波长为250-270nm。 8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，柱温控制在35～40℃。 9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，进样量为2～8μl。 10.一种测定姜黄素含量的高效液相方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液及供试品溶液的制备：精密称取适量姜黄素对照品，用二甲基亚砜溶解并定容成具有一定浓度梯度的多个对照品溶液；精密称取适量姜黄素供试品，用甲基亚砜溶解并定容得到供试品溶液； (2)色谱条件：色谱柱采用反相C18色谱柱；检测器采用PDA检测器；流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.025％，水溶液中醋酸铵浓度为1mM，水溶液与乙腈的体积比为95：5；流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.025％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为1mM，乙腈溶液与水的体积比为95：5；采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：0～0.01min，流动相B保持体积百分比为50％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由50％递增至60％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由60％递减至50％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为50％； (3)测定方法：将所述多个对照品溶液以及供试品溶液按所述(2)色谱条件依次进样，记录色谱图，根据多个对照品溶液的图谱数据和浓度数据制备线性相关工作曲线，代入供试样品的图谱数据计算并得出供试品溶液浓度，完成了姜黄素含量的测定。 11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的浓度依次为6.25、12.5、25、50、100、200μg/ml。 12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，色谱条件中流速为1.4ml/min，检测波长为254nm，柱温为40℃，进样量为3～5μl。
所属类别：	发明专利