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一种均相化学发光法检测促甲状腺激素的试剂盒
| 专利名称： | 一种均相化学发光法检测促甲状腺激素的试剂盒 |
| 摘要： | 本发明公开了一种能够同时检测促甲状腺激素（TSH）浓度的试剂盒，所述方案通过如下步骤实现：（1）TSH抗体制备；（2）吖啶衍生物标记TSH抗体；（3）Fermin标记TSH抗体（4）夹心法检测。本发明芯片用于检测病人的血液中促甲状腺激素（TSH）浓度的浓度，本方法形成的试剂盒反应步骤简单，检测快速，设备简易化，实现化学发光POCT检测，结果精准，延续化学发光平台的优势，灵敏度高，线性范围宽，稳定性好。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 常州普林森科技有限公司 |
| 发明人： | 成舜 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-04-01T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-06-14T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910254835.2 |
| 公开号： | CN109884325A |
| 分类号： | G01N33/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 213000 江苏省常州市武进区延政西大道8号(常州市武进绿色建筑产业集聚示范区)创研中心西楼403室 |
| 主权项： | 1.一种能够同时检测促甲状腺激素（TSH）浓度的试剂盒，所述方案通过如下步骤实现：（1）TSH抗体制备；（2）吖啶衍生物标记TSH抗体；（3）Fermin标记TSH抗体；（4）夹心法检测。 2.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于步骤（2）中所述吖啶衍生物标记TSH抗体的方法为： （1）将多聚赖氨酸溶解于1mL10-200mM PBS缓冲液（pH7.4）中，终浓度5-20nmol/L，加入10μL溶解于DMSO溶剂的5-20mmol/L吖啶酯，于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱（Thermo fish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的吖啶酯及反应副产物，得到吖啶-多聚赖氨酸溶液； （2）向上述纯化过的吖啶-多聚赖氨酸溶液中加入EDC(终浓度为2-10mmol/L)和NHS(终浓度为5-20mmol/L )；加入25℃反应15-45分钟后，加入终浓度为5-20mM的巯基乙醇，得到活化后的吖啶-多聚赖氨酸； （3）在加入1mg抗TSH抗体，混匀，置于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的NHS及反应副产物，得到结合物吖啶酯-多聚赖氨酸-TSH抗体溶液。 3.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于步骤（3）中所述hemin标记TSH抗体的方法为： （1）在5-20mmol/L hemin水溶液中加入NHS(终浓度为5-20mmol/L )；加入25℃反应15-45分钟后，加入终浓度为5-20mM的巯基乙醇，得到活化后的氯化血红素； （2）在加入1mg抗TSH抗体，混匀，置于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS( pH 7 .4)缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的NHS及反应副产物，得到结合物氯化血红素-TSH抗体溶液。 4.一种权利要求1~3任一项所述试剂盒的应用，其特征在于将所述试剂制成试剂盒。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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