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原文传递去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法

专利名称：	去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法
摘要：	本发明公开了一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，具体为：将植物叶片在pH＝7.0的研磨液中冰浴研磨得到匀浆液；然后加入等体积的提取液A，提取液A为丙酮和正己烷按照体积比1：1混合，涡旋混匀后得到混合液，将混合液离心，吸取上清液，然后加入等体积的三氯甲烷溶液，再次涡旋混匀后得到混合液，将混合液离心，吸取上层水相溶液，采用比色法测定上层水相溶液中的H2S含量。本发明能有效地去除植物叶片总叶绿素对H2S含量测定的干扰，采用比色法测定植物叶片中H2S的含量，测定结果准确、可靠，操作简便、实用、快速、可操作性强，解决了现有技术中存在的问题。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	桂林理工大学
发明人：	于晓章;林钰涓
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910248898.7
公开号：	CN109916842A
代理机构：	西安知诚思迈知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	闵媛媛
分类号：	G01N21/33(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	532100 广西壮族自治区桂林市建干路12号桂林理工大学
主权项：	1.一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤S1，将植物叶片在pH＝7.0的研磨液中冰浴研磨得到匀浆液；步骤S2，吸取匀浆液，然后加入等体积的提取液A，涡旋混匀后得到混合液，提取液A为丙酮和正己烷按照体积比1：1混合得到；步骤S3，将步骤S2得到的混合液在4℃的条件下离心12-15min，离心速度为12000-14000r/min；步骤S4，吸取上清液，然后加入等体积的提取液B，涡旋混匀后得到混合液，提取液B为三氯甲烷溶液；步骤S5，将步骤S4得到的混合液在4℃的条件下离心3-4min，离心速度为10000-12000r/min；步骤S6，吸取上层水相溶液，采用比色法测定上层水相溶液中的H2S含量，即得植物叶片中H2S含量。 2.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S6，采用比色法测定上层水相溶液中的H2S含量的方法具体为：准确吸取2-3mL水相溶液，向溶液中加入等体积的反应液C，25℃下反应2min，用紫外分光光度计在412nm波长处测定吸光度值，反应液C为0.0317g5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)溶于200毫升研磨液中得到；式中，C：根据标准曲线拟合方程计算出所测样品吸光度值对应的H2S浓度，μmol/L；V1：步骤S1所用的研磨液体积，mL；V2：步骤S2吸取的匀浆液体积，mL；V3：步骤S6吸取的水相溶液体积，mL；Fw：步骤S1中植物叶片鲜重，g。 3.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S1中，研磨液为100mM磷酸钾缓冲液，磷酸钾缓冲液中含10mM EDTA。 4.根据权利要求3所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述研磨液的用量为：每0.15-0.20g植物叶片加入3.0-5.0mL研磨液。 5.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S2中，涡旋混合的混合速度为2800-3000r/min，混合时间为15-18s。 6.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S3中，离心时间为15min。 7.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S4中，涡旋混合的混合速度为2800-3000r/min，混合时间为15-18s。 8.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法，其特征在于，所述步骤S5中，离心时间为3min。
所属类别：	发明专利