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原文传递一种增殖细胞核抗原的偶联方法

专利名称：	一种增殖细胞核抗原的偶联方法
摘要：	本发明涉及免疫领域，具体而言，涉及一种增殖细胞核抗原的偶联方法。一种增殖细胞核抗原的偶联方法，包括以下步骤：活化的羧化微粒在醋酸盐溶液中与增殖细胞核抗原进行偶联反应。本发明提供的一种增殖细胞核抗原的偶联方法，是由发明人发现得到，选用醋酸盐溶液进行偶联，有效解决了抗原偶联效率低、偶联重复性差的问题，使目标抗原能够稳定地偶联在微粒载体上，便于应用于目标抗体的检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	珠海丽珠试剂股份有限公司
发明人：	曾敏霞;王国磊;陈敏华;储迅涛;邓京
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910261654.2
公开号：	CN109946453A
代理机构：	北京超成律师事务所
代理人：	滕俊强
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	519000 广东省珠海市香洲区同昌路266号1栋、2栋、3栋、4栋
主权项：	1.一种增殖细胞核抗原的偶联方法，其特征在于，活化的羧化微粒在醋酸盐溶液中与增殖细胞核抗原进行偶联反应。 2.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，所述醋酸盐溶液中的醋酸盐的浓度为10-100mM，pH为5±0.2，所述醋酸盐溶液中还含有氯化钠，所述氯化钠在所述醋酸盐溶液中的浓度为0-0.3M；优选地，所述醋酸盐溶液中的醋酸盐的浓度为20-50mM；优选地，所述氯化钠在所述醋酸盐溶液中的浓度为0.1-0.2M；优选地，所述醋酸盐溶液的组分为醋酸盐和醋酸；优选地，所述醋酸盐为醋酸钠。 3.根据权利要求2所述的偶联方法，其特征在于，所述偶联反应中，所述醋酸盐溶液的体积为50-200μL，优选为100-200μL。 4.根据权利要求3所述的偶联方法，其特征在于，所述增殖细胞核抗原的添加量为10-30ng，优选为20±5ng。 5.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，所述偶联反应为：在室温条件下震荡1-3h，优选为1.5-2.5h。 6.根据权利要求5所述的偶联方法，其特征在于，所述震荡的条件为1000±200rpm。 7.根据权利要求1所述的偶联方法，其特征在于，偶联反应结束后经封闭处理，悬浮即可；进一步地，所述封闭处理采用的封闭液为牛血清白蛋白溶液，所述牛血清白蛋白溶液中的牛血清白蛋白的质量浓度为1％±0.2％。 8.根据权利要求7所述的偶联方法，其特征在于，所述封闭处理为先采用所述封闭液洗涤1-3次，然后加入所述封闭液，以1000±200rpm进行震荡处理50-80min。 9.根据权利要求7所述的偶联方法，其特征在于，所述悬浮采用含有质量浓度为1％±0.2％的牛血清白蛋白的PBST进行。 10.根据权利要求1-9任一项所述的偶联方法，其特征在于，所述微粒为磁微粒、硅微粒、银微粒、金微粒或其复合微粒；进一步地，所述羧化微粒采用以下方法活化：微粒悬浮液中加入NHS溶液和EDC溶液处理。
所属类别：	发明专利