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一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法
| 专利名称： | 一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白(Aβ)的方法，属于医药技术领域。本发明中将2‑吡啶基苯并噻唑与丹磺酰荧光基团偶联制得金属离子比例计量型荧光探针BPNS。可溶性Aβ对Zn2+或Cu2+具有高亲和性，能够将金属离子从BPNS‑金属离子加合物中螯合出来，从而触发BPNS的比例计量型荧光响应。通过确定BPNS双波长荧光强度比值与可溶性Aβ聚集体浓度的线性关系，可实现准确定量检测可溶性Aβ聚集体。该方法在AD早期诊断方面具有很好的应用前景。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京工业大学 |
| 发明人： | 王小辉;李长洪;杨柳 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-03-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-06-28T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910259043.4 |
| 公开号： | CN109946280A |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 211816 江苏省南京市鼓楼区新模范马路5号 |
| 主权项： | 1.一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法，其特征在于，该方法包括： 步骤一：合成如下结构的比例计量型荧光探针： 步骤二：评估步骤一制得的比例计量型荧光探针对Zn2+或Cu2+的比例计量荧光响应性能； 步骤三：将β淀粉样蛋白样品加入到缓冲溶液中，在37℃分别孵育0h、24h、48h和72h制备可溶性β淀粉样蛋白单体、可溶性寡聚体、不溶性纤维前体和不溶性纤维体溶液； 步骤四：在步骤一制得的比例计量型荧光探针结合金属离子形成的加合物溶液中分别加入步骤三制得的溶液，测试加合物对可溶性β淀粉样蛋白样品的选择性比例计量荧光响应； 步骤五：通过步骤一制得的比例计量型荧光探针与金属离子形成的加合物对不同浓度的步骤三制得的可溶性β淀粉样蛋白寡聚体的比例计量荧光响应来确定定量检测浓度范围； 步骤六：利用步骤一制得的比例计量型荧光探针与金属离子形成的加合物检测不同样品中可溶性β淀粉样蛋白的含量。 2.根据权利要求1所述的一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法，其特征在于，所述的比例计量型荧光探针以生色团2-吡啶基苯并噻唑为金属离子螯合基团偶联丹磺酰荧光基团制得。 3.根据权利要求1所述的一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法，其特征在于，所述的金属离子为Zn2+或Cu2+。 4.根据权利要求1所述的一种用比例计量型荧光探针定量检测可溶性β淀粉样蛋白的方法，其特征在于，所述的缓冲溶液为20mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH 7.4。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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