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原文传递一种流式细胞仪散射光和荧光检测装置及方法

专利名称：	一种流式细胞仪散射光和荧光检测装置及方法
摘要：	本发明提供了一种流式细胞仪散射光和荧光检测装置及方法，具有中心波长为638mm和488mm的两个固体激光器，光斑整形模块将两个固体激光器发出的光束压缩为一设定尺寸的两个椭圆形光斑，调节两个光斑的焦距以使光斑能量的最高处照射流动室中的样品细胞，改变所述流动室中样品细胞的流速以及照射时间，从而改变检测频率、脉冲信号的频率和持续时间，然后分别对前向散射光、侧向散射光及荧光进行整形和检测，采用双激光，能激发更多种类的样品，整体光路分布简单明了，占用空间较小，能够将激光光束更好的压缩成椭圆形光斑，并且接收到的散射光和荧光信号都是转换成电压信号输出，电压信号相比较而言更方便快捷被采集处理，使后续的数据处理分析更精确。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西师范大学
发明人：	宋树祥;于丽华;冀聪聪;王瑞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910292708.1
公开号：	CN109946219A
代理机构：	北京中济纬天专利代理有限公司
代理人：	石燕妮
分类号：	G01N15/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N15
申请人地址：	541004 广西壮族自治区桂林市七星区育才路15号
主权项：	1.一种流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，包括：光源，所述光源包括两个具有不同设定中心波长的固体激光器；光斑整形模块，位于所述光源下方，用于将两个固体激光器发出的光束压缩为一设定尺寸的两个椭圆形光斑；流动室，用于设置样品细胞，所述椭圆形光斑逐一照射单向排列的样品细胞后形成散射光和荧光，所述散射光包括前向散射光和侧向散射光，所述前向散射光和所述侧向散射光之间构成一直角；前向散射光整形模块及前向散射光检测电路，所述前向散射光整形模块将第一设定范围内的前向散射光聚焦后入射至所述前向散射光检测电路，所述前向散射光检测电路对所述聚焦后的前向散射光顺次进行光电转换、I/V转换、放大调理、数模转换及脉冲参数提取；侧向散射光及荧光整形模块及侧向散射光及荧光检测电路，所述侧向散射光及荧光整形模块将第二设定范围内的侧向散射光及荧光聚焦后入射至所述侧向散射光及荧光检测电路，所述侧向散射光及荧光检测电路对所述聚焦后的侧向散射光及荧光顺次进行光电转换、I/V转换、放大调理、数模转换及脉冲参数提取。 2.如权利要求1所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，两个所述固体激光器并排排列，所述光斑整形模块包括反光镜、合光镜及聚焦透镜，所述反光镜及所述合光镜分别位于所述两个所述固体激光器的下方，所述反光镜将一个所述固体激光器发出的光束反射至所述合光镜，所述合光镜将两个所述固体激光器发出的光束入射至所述聚焦透镜，所述聚焦透镜将两个光束压缩成所述设定尺寸的两个椭圆形光斑。 3.如权利要求1所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，所述前向散射光整形模块包括沿正向光路设置的第一光阑、前向聚光镜及第一带通滤光片，所述前向散射光检测电路包括顺次连接的光电二极管探测器、第一I/V转换电路、第一信号放大调理电路及第一模数转换电路。 4.如权利要求1所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，所述侧向散射光及荧光整形模块包括第一侧向光路、第二侧向光路、第三侧向光路及第四侧向光路，所述第一侧向光路上顺次设置有侧向聚光镜组、第一二向色分光片、第二二向色分光片、第二光阑及第二带通滤光片，所述第二侧向光路上顺次设置有侧向聚光镜组、第一二向色分光片、第二二向色分光片及第三带通滤光片，所述第三侧向光路上顺次设置有侧向聚光镜组、第一二向色分光片、第三二向色分光片、第四二向色分光片、第四带通滤光片及第五带通滤光片，所述第四侧向光路上顺次设置有侧向聚光镜组、第一二向色分光片、第三二向色分光片、第五二向色分光片、第六带通滤光片及第七带通滤光片。 5.如权利要求4所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，所述侧向散射光及荧光检测电路包括第一光电倍增管、第二光电倍增管、第三光电倍增管、第四光电倍增管、第五光电倍增管、第六光电倍增管及与6个光电倍增管连接的第二I/V转换电路、第二信号放大调理电路及第二模数转换电路，所述第一光电倍增管沿着所述第一侧向光路设置且位于所述第二带通滤光片后方，所述第二光电倍增管沿着所述第二侧向光路设置且位于所述第三带通滤光片后方，所述第三光电倍增管和第四光电倍增管沿着所述第三侧向光路设置且位于所述第四带通滤光片和第五带通滤光片后方，所述第五光电倍增管和第六光电倍增管沿着所述第四侧向光路设置且位于所述第六带通滤光片和第七带通滤光片后方。 6.如权利要求1所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置，其特征在于，两个所述固定激光器的设定中心波长分别为638mm和488mm。 7.一种利用如权利要求1-6中任一项所述的流式细胞仪散射光和荧光检测装置执行流式细胞仪散射光和荧光检测的方法，其特征在于，包括：两个固定激光器发出光束到达光斑整形模块，所述光斑整形模块对两个光束进行压缩以得到两个设定尺寸的椭圆形光斑；调节两个光斑的焦距以使光斑能量的最高处照射流动室中的样品细胞；改变所述流动室中样品细胞的流速以及照射时间，从而改变检测频率、脉冲信号的频率和持续时间；前向散射光整形模块及前向散射光检测电路对前向散射光进行整形和检测，侧向散射光及荧光整形模块及侧向散射光及荧光检测电路对侧向散射光及荧光进行整形和检测。 8.如权利要求7所述的流式细胞仪散射光和荧光检测方法，其特征在于，两个椭圆形光斑上下排列，光斑的聚焦点在水平方向的距离小于10微米，在竖直方向的距离介于80微米-100微米。
所属类别：	发明专利