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原文传递一种检测畜禽粪便中环丙沙星的方法

专利名称：	一种检测畜禽粪便中环丙沙星的方法
摘要：	本发明涉及兽残检测技术领域，公开了一种检测畜禽粪便中环丙沙星的方法，包括样品的预处理和HPLC分析，所述样品的预处理时直接采用与HPLC流动相成分相同的乙腈‑磷酸溶液洗脱HLB小柱，不仅洗脱效果好，而且简化了操作工艺，缩短了检测周期，降低了前期处理的工作量和投入成本。本发明以畜禽粪便为样品，取样方便，无任何破坏性，不会引起动物的任何伤害和疼痛，易于贮存；对所述样品进行特定的预处理，有效降低样品中的基质干扰，提高了检测结果的准确性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江西;36
申请人：	江西省农业科学院畜牧兽医研究所
发明人：	李海琴;康昭风;谭美芳;曾艳兵;季华员;曾凡新;唐维国
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910169810.2
公开号：	CN109946392A
代理机构：	北京三聚阳光知识产权代理有限公司
代理人：	胡丹丹
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	330299 江西省南昌市南昌县莲塘江西省农业科学院畜牧兽医研究所
主权项：	1.一种检测畜禽粪便中环丙沙星的方法，包括样品的预处理和HPLC分析，其特征在于，所述样品的预处理包括如下步骤： (1)用EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取畜禽粪便，收集上清液； (2)将上述上清液加入活化后的HLB小柱上，用水淋洗，抽干，再用乙腈-0.05mol/L磷酸溶液洗脱，收集洗脱液，过0.45μm滤膜，得待测样品溶液。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙腈-0.05mol/L磷酸溶液中乙腈与0.05mol/L磷酸的体积比为15:85。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述EDTA-Mcllvaine缓冲溶液的配制方法为：称取37.2g乙二胺四乙酸二钠置于1mol/L Mcllvaine缓冲溶液中，充分溶解至得到均一溶液。 4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：向畜禽粪便中加入EDTA-Mcllvaine缓冲溶液，涡旋10～30s，超声10～20min，离心，收集上清液，残渣重复提取1～2次，合并提取液的上清液。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在所述向畜禽粪便中加入EDTA-Mcllvaine缓冲溶液前还包括对所述畜禽粪便进行干燥，使其含水量≤10wt％的步骤。 6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述收集洗脱液后还包括对洗脱液进行涡旋至少10s的步骤。 7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述HPLC分析的色谱条件为：色谱柱：C18 250mm×4.6nm，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶为，粒径为5μm；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸溶液(v:v＝15:85)；流速：0.8mL/min；进样量：10μL；柱温：30℃；检测器：荧光检测器，激发波长为280nm，发射波长为450nm。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，进行所述HPLC分析前还包括环丙沙星标准溶液的配制，具体包括如下步骤：取环丙沙星标准品，加入所述流动相稀释成至少3种不同浓度的环丙沙星标准溶液。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述HPLC分析包括如下步骤：吸取不同浓度的所述环丙沙星标准溶液10μL注入HPLC分析仪，根据测定结果绘制环丙沙星峰面积-溶液浓度的标准曲线图；吸取所述待测样品溶液10μL注入HPLC分析仪，根据峰面积及所述标准曲线图，计算得到所述待测样品溶液中环丙沙星的含量。
所属类别：	发明专利