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原文传递 一种基于适配体的肿瘤细胞染色探针组合
专利名称: 一种基于适配体的肿瘤细胞染色探针组合
摘要: 本公开涉及肿瘤细胞染色技术领域,具体涉及一种基于适配体的肿瘤细胞染色探针组合。利用荧光标记适配体对循环肿瘤细胞的原位癌进行鉴定,建立小鼠乳腺癌和肝癌双肿瘤模型,收集被捕获的CTCs利用带有ROX标记的乳腺癌细胞适配体和Cy5标记的肝癌细胞适配体进行特异性染色,优化了适配体染色浓度及时间,且可以同时染色,节约了染色时间,利用荧光显微镜观察染色结果,可判断CTC的来源。本公开提供的肿瘤细胞染色探针,可同时对两种肿瘤细胞进行染色,特异性大大提高,且各荧光适配体之间互不影响,可同时进行染色,大大节约了染色时间,提高了循环肿瘤细胞原位癌判定效率。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 山东;37
申请人: 山东师范大学
发明人: 贾敏;张鸿雁;毛艺霏;刘晓宇
专利状态: 有效
申请日期: 2019-04-18T00:00:00+0800
发布日期: 2019-07-05T00:00:00+0800
申请号: CN201910314932.6
公开号: CN109975097A
代理机构: 济南圣达知识产权代理有限公司
代理人: 张晓鹏
分类号: G01N1/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址: 250014 山东省济南市历下区文化东路88号
主权项: 1.一种用于混合肿瘤细胞染色的探针组合,其特征在于,所述探针组合包括一种乳腺癌细胞染色探针和一种肝癌细胞染色探针,所述乳腺癌细胞染色探针为荧光染料标记的雌激素适配体,所述肝癌细胞染色探针为荧光染料标记的肝癌细胞适配体。 2.如权利要求1所述的探针组合,其特征在于,所述雌激素适配体序列为: 5’-CCCGGCATGGTTGCGGAGCAGGAGTATAACACTACCATTG-3’。 3.如权利要求1所述的探针组合,其特征在于,所述肝癌细胞适配体序列为: 5’-ATGGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATGGTGCGCGCATAGCGCGCTGAGCTGAAGATCGTACCGTGAACCAT-3’。 4.如权利要求1所述的探针组合,其特征在于,所述乳腺癌细胞染色探针采用ROX染料标记;优选的,所述雌激素适配体在5’端连接ROX染料。 5.如权利要求1所述的探针组合,其特征在于,所述染色探针采用Cy5荧光染料标记;优选的,肝癌细胞适配体在5’端连接Cy5染料。 6.权利要求1-5任一项所述的探针组合在混合样品中肿瘤细胞筛选方面的应用;优选的,所述肿瘤细胞筛选为对乳腺癌细胞和肝癌细胞的筛选。 7.一种癌症早期诊断的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括权利要求1-5任一项所述的探针组合。 8.如权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括酶标板、洗脱液、免疫荧光染色试剂;优选的,所述免疫荧光染色试剂包括固定液、透膜液、清洗液及DAPI染料。 9.一种对肿瘤细胞染色方法,其特征在于,所述方法权利要求1-5任一项所述的探针组合对样品中的肿瘤细胞进行染色。 10.如权利要求9所述的染色方法,其特征在于,所述染色时间为1~2h;或所述雌激素适配体染色浓度为0.03~0.08μM;或所述肝癌细胞适配体染色浓度为0.2~0.35μM。
所属类别: 发明专利
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