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原文传递多色荧光染料和荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法

专利名称：	多色荧光染料和荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法
摘要：	本发明揭示了一种适用于多色荧光染料以及荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法，包括：将荧光标记的生物组织样本进行预处理；依次放入不同浓度TB的树脂溶液中梯度渗透，每个浓度1h‑2h,之后作用浓度TB的树脂溶液中渗透12‑24h；用树脂渗透液对上述所述的经梯度处理的样本进行包埋、加热聚合后，得到包埋的荧光标记样本。本发明以TB作为背景抑制剂，可以抑制背景光，且可以兼容多色荧光染料和荧光蛋白的使用。本发明所提供的包埋方法，适用于多种树脂包埋，同时适用于多种荧光染料以及荧光蛋白标记的样本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	华中科技大学苏州脑空间信息研究院
发明人：	李向宁;龚辉;田娇娇;任淼
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910240895.9
公开号：	CN109991055A
代理机构：	南京艾普利德知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	陆明耀
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	215000 江苏省苏州市工业园区若水路388号
主权项：	1.一种多色荧光染料以及荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法，其特征在于，包括：将生物组织样本进行预处理；将预处理后的生物组织样本依次放入0； 5-95wt%的梯度浓度酒精中进行渗透，每个梯度0； 5-3小时，随后分别在含0； 7-1wt/%TB不同质量浓度的梯度树脂中渗透6-24小时；用树脂渗透液对所述经梯度浓度渗透后的样本进行包埋、加热聚合后得到包埋的荧光染料标记样本。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对生物组织样本进行预处理包括：将生物组织样本在多聚甲醛固定液中固定12-24小时；将固定后的生物组织样本在漂洗液中漂洗6-12小时；将所述漂洗后的生物组织样本依次放入冰水预冷却的50%、70%乙醇溶液中进行梯度脱水，再在95%或100%乙醇溶液中进行脱水，每次5分钟到2小时。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述不同质量浓度的梯度树脂的质量浓度为第一梯度40%~60%、第二梯度60%~70%、第三梯度70~90%和第四梯度90%~100%。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述不同浓度的树脂溶液的质量浓度分别为第一梯度50%、第二梯度70%、第三梯度85%和第四梯度100%。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度浓度酒精溶液的质量浓度分别为50%、70%、85%和100%。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用树脂渗透液对所述经梯度渗透后的生物组织样本进行包埋具体为：将梯度渗透后的生物组织样本放置于包埋模具中，随后在模具中充满包埋树脂液。 7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述树脂渗透液和包埋树脂溶液中的树脂具体为GMA树脂。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，加热后得到包埋的荧光染料标记样本具体为：将所述填充后的模具在35℃-40℃下加热12到24小时。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述树脂溶液的溶剂为95%乙醇。 10.根据权利要求1~9任意一条权利要求所述的方法，其特征在于，所述生物组织样本选自荧光探针标记的生物组织样本。
所属类别：	发明专利