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原文传递用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法

专利名称：	用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法
摘要：	本发明涉及一种用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法，包括：将含有蛋白聚合物的基质与考马斯亮蓝染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；用高温处理的步骤将所述基质中的考马斯亮蓝洗去以进行脱色，获取考马斯亮蓝染色结果图像；将所述基质使用银染致敏液处理后，在高温条件下与水接触；将所述基质与银染染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；将所述基质与银染显色液接触，获取银染结果图像。该方法可对包埋在基质中的蛋白聚合物先后进行考马斯亮蓝染色和银染，节约实验时间，结果更为准确，系统误差更小。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东菲鹏生物有限公司
发明人：	成谦;项金凤;陈燕平
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910315732.2
公开号：	CN110007093A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	王焕
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	523000 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区花莲路5号1号厂房7楼
主权项：	1.一种用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法，其特征在于，包括： a)将含有蛋白聚合物的基质与考马斯亮蓝染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；所述考马斯亮蓝染色液中含有0.001％(v/v)～0.003％(v/v)的甲醛； b)用包括80℃～100℃处理的步骤将所述基质中的考马斯亮蓝洗去以进行脱色，获取考马斯亮蓝染色结果图像； c)将所述基质使用银染致敏液处理后，在80℃～100℃的条件下与水接触； d)将所述基质与银染染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色； e)将所述基质与银染显色液接触，获取银染结果图像。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤b)和c)中，80℃～100℃的持续时间均为5min～10min。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤b)和c)中，80℃～100℃处理时，所述基质均浸泡于水中；优选的，所述80℃～100℃采用微波或水浴加热以达到并保持该温度。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤b)中，先清洗后再80℃～100℃处理；所述清洗具体为用水清洗，或先用考马斯亮蓝脱色液清洗10min～15min后再用水清洗。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤e)中，将所述基质与银染显色液接触之后，获取银染结果图像之前还包括：使用银染终止液终止显色5min～15min。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述考马斯亮蓝选自G250、R250、R150、R350中的任一种或几种。 7.根据权利要求1或6所述的方法，其特征在于，所述考马斯亮蓝染色液中还包含酸、除甲醛以外的有机溶剂和水，以及任选地包含缓冲剂。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述酸为磷酸和/或乙酸；所述除甲醛以外的有机溶剂为醇，优选包括甲醇、乙醇以及异丙醇中的至少一种；优选的，所述考马斯亮蓝染色液在使用时的工作浓度为：乙酸7％～13％(v/v)、乙醇40％～50％(v/v)、甲醛0.001％(v/v)～0.003％(v/v)以及考马斯亮蓝0.575g/L～0.650g/L。 9.根据权利要求1、2、4、5、6、8任一项所述的方法，其特征在于，所述基质包括聚酯，聚酯/纤维素共混物，聚丙烯，聚丙烯/纤维素共混物，聚丙烯酰胺，SDS-聚丙烯酰胺，硝酸纤维素，非纤维素，多糖，琼脂糖，毡，聚偏氟乙烯，聚偏二氟乙烯，细织棉，羊毛，再生纤维素纤维，Lyocell中的一种，或它们的组合。 10.根据权利要求1、2、4、5、6、8任一项所述的方法，其特征在于，所述蛋白聚合物包括肽、蛋白质、多肽-多肽复合物、蛋白质-蛋白质复合物、多肽-蛋白质复合物、RNA-多肽复合物、DNA-多肽复合物、RNA-蛋白质复合物、DNA-蛋白质复合物中的一种或多种。
所属类别：	发明专利