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原文传递一种基于Olsen法的土速效磷测定方法

专利名称：	一种基于Olsen法的土速效磷测定方法
摘要：	本发明属于土壤养分形态分析测定的技术操作领域，公开了一种基于Olsen法的土速效磷测定方法，首先配制浸提剂、钼锑贮备液、对比试剂、磷标准溶液和显色剂。通过称样、加试剂、震荡、过滤等操作制备待测液。通过吸取标准系列、加入试剂、加水，加显色剂、测定吸光度等步骤，绘制标准曲线。通过吸取待测液、加水、加显色剂，测定吸光度等步骤进行待测液中磷的测定。进行标准曲线回归方程计算、土壤速效磷含量的计算。本发明通过改进试剂配制、改进反应体系、改进对比反应等，简化了操作，减少了误差来源，缩短了操作时间，减少试剂类型和用量，操作简单，快速，成本低廉，节约了成本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	湖北大学
发明人：	杨兰芳;李亚东;张健琳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910338430.7
公开号：	CN110018129A
代理机构：	北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	汤东凤
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	430062 湖北省武汉市武昌区友谊大道368号
主权项：	1.一种基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，所述基于Olsen法的土速效磷测定方法包括：利用标准曲线回归方程、土壤速效磷含量公式获取土壤速效磷含量数据；计算标准曲线回归方程：y＝ax+b，浓度为纵坐标y，以吸光度为横坐标x；土壤速效磷含量：其中，y表示由浸提液中磷的测定中得到吸光度ΔA＝AS-AK代入标准曲线回归方程y＝ax+b得到的样品显色液中速效磷的浓度μg mL-1，W为所称土壤样品的质量，V为所加浸提剂的体积，Vs是浸提液中磷的测定时所吸取浸提液的体积。 2.如权利要求1所述的基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，所述基于Olsen法的土速效磷测定方法具体包括：步骤一，配制浸提剂、钼锑贮备液、对比试剂、磷标准溶液和显色剂；步骤二，通过称样、加试剂、震荡、过滤操作制备待测液；步骤三，通过吸取标准系列、加入试剂、加水，加显色剂、测定吸光度等步骤，绘制标准曲线；步骤四，通过吸取待测液、加水、加显色剂，测定吸光度等步骤进行待测液中磷的测定；步骤五，进行标准曲线回归方程计算、土壤速效磷含量的计算。 3.如权利要求2所述基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，步骤一中，具体包括： (1)浸提剂的配制方法：称取42.00g碳酸氢钠，溶于约900mL纯水中，调剂pH为8.5后，定容至1000mL，摇匀备用； (2)钼锑储备液的配制方法：取1000mL玻璃烧杯，加入约800mL纯水，再缓慢加入181mL浓硫酸，边加边搅拌，再加入10g钼酸铵和0.5g酒石酸锑钾，充分搅拌使其溶解后，放置冷却至室温后定容至1000mL，摇匀备用； (3)对比试剂的配制方法：取200mL玻璃烧杯，加入约80mL纯水，再缓慢加入18.1mL浓硫酸，边加边搅拌，放冷至室温后定容至100mL，摇匀备用； (4)磷标准溶液配制方法：称取0.4390g磷酸二氢钾(KH2PO4，分析纯，105℃烘2h)溶于200mL水蒸馏水中，加入5mL浓硫酸，转入1L容量瓶中定容摇匀，此为100μg mL-1磷标准贮存液，可以长期保存；吸取5mL磷标准贮存液于200mL容量瓶中，用纯水定容，摇匀，此为2.5μgmL-1的磷标准工作液； (5)钼锑抗显色剂的配制方法：称取1.5g抗坏血酸，加入钼锑储备液100mL，搅拌溶解，临用当天配制。 4.如权利要求2所述基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，步骤二中，所述待测液的制备方法具体包括： (1)称样：称取过1mm筛的风干土2.5g于100mL三角瓶中； (2)加试剂：向三角瓶中加入50mL浸提剂； (3)振荡：将三角瓶放在振荡机上在180rpm下振荡30分钟； (4)过滤：将三角瓶取下，用定量滤纸干过滤于干净的三角瓶中。 5.如权利要求2所述基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，步骤三中，所述标准曲线的绘制方法具体包括： (1)吸取标准系列：取6个50mL三角瓶或烧杯，分别加入磷标准工作液0、1、2、3、4、5mL，并依次加水5、4、3、2、1、0mL； (2)补充浸提剂：向三角瓶或烧杯中加入5mL浸提剂； (3)加水：向三角瓶或烧杯中加入17.5mL纯水； (4)加显色剂：向三角瓶或烧杯中添加钼锑抗显色剂2.5mL； (5)摇动赶气泡：向三角瓶或烧杯摇动10秒，混合均匀，赶走气泡； (6)显色：将三角瓶或烧杯摇匀，在大于15℃的条件下放置30分钟； (7)测定吸光度：打开分光光度计，选择波长700或880nm，然后用纯水调节仪器零点，将三角瓶或烧杯的液体依次从低到高倒入比色皿，测定吸光度；此标准系列的磷的浓度依次为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg mL-1。 6.如权利要求2所述基于Olsen法的土速效磷测定方法，其特征在于，步骤四中，所述待测液中磷的测定具体包括以下步骤： (a)吸取待测液：取50mL三角瓶或烧杯两个，分别标号为K和S，各加土壤浸提液5mL； (b)加水：向K和S的三角瓶或烧杯中分别加入17.5mL纯水； (c)加显色剂：向K中加入2.5mL对比试剂，S中加入2.5mL钼锑抗显色剂； (d)摇动赶气泡：将K三角瓶或烧杯、S三角瓶或烧杯各摇动10秒，混合均匀、赶走气泡； (e)显色：将K三角瓶或烧杯、S三角瓶或烧杯分别摇匀，在大于15℃的条件下放置30分钟； (f)测定吸光度：待标准曲线测定完成后，将K三角瓶或烧杯、S三角瓶或烧杯中液体分别倒入比色皿，分别测定K和S的吸光度，分别记为AK和AS。 7.一种实施权利要求1-6任意一项所述基于Olsen法的土速效磷测定方法的基于Olsen法的土速效磷测定设备。
所属类别：	发明专利