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原文传递一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法

专利名称：	一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法
摘要：	本发明属于生物传感器技术领域，公开了一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法。氮化碳量子点作为一种新型的共反应物可以增强发光体(Ru(dcbpy)32+)的电化学发光信号。为了实现对汞离子的特异性检测，我们引入了富含T碱基的DNA1和DNA2，并将其分别连在发光体和共反应物上，DNA1和DNA2可以通过汞离子进行配对结合，发光体与共反应物之间的距离变近，电化学发光信号进一步增强。构筑的电化学发光生物传感器对汞离子的检测限为3.3×10‑15mol·L‑1。本发明提供的电化学发光生物传感器成本低、灵敏度高、选择性好，适用于地表水中汞离子含量的实际应用检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏大学
发明人：	由天艳;张家一;李丽波;罗莉君;刘晓红
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910163882.6
公开号：	CN110018211A
分类号：	G01N27/30(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
主权项：	1.一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)Ru(dcbpy)32+-DNA1复合材料的制备：将三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌溶于磷酸盐缓冲溶液中，将1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸EDC和N,N-二甲基甲酰胺NHS混合溶液加入到上述溶液中搅拌，之后加入DNA1继续搅拌，再加入乙酸钠溶液和乙醇进行沉淀反应，离心、洗涤、干燥，得到Ru(dcbpy)32+-DNA1复合材料； (2)g-C3N4QDs-DNA2复合材料的制备：含有EDC和NHS的混合液加入到g-C3N4QDs溶液中，搅拌后加入DNA2溶液继续进行搅拌，得到g-C3N4QDs-DNA2复合材料； (3)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨进行抛光处理，直到呈镜面，用乙醇和二次水超声清洗； (4)配制含有汞离子标准液、Ru(dcbpy)32+-DNA1、g-C3N4QDs-DNA2和磷酸盐缓冲溶液的混合液； (5)取步骤(4)所得的混合液修饰到经步骤(3)处理的电极上，室温下进行干燥； (6)在步骤(5)处理的电极上修饰Nafion进行材料固定。 2.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌，EDC和NHS的混合溶液，DNA1，乙酸钠溶液和乙醇的用量比例为4mg：2mL：1.6mL：800μL：16mL；其中，EDC和NHS的质量比为4:1，DNA1的浓度为0.5-3μM，乙酸钠溶液的浓度为0.5-5M。 3.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，第一次搅拌为室温下搅拌2h；第二次搅拌为25℃下搅拌6-12h，搅拌速度为100rpm；沉淀反应5-12h，温度-30-1℃。 4.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，EDC和NHS的混合液、g-C3N4QDs的溶液、DNA2溶液的用量比例为400μL：1.6mL：1.6mL；其中，EDC和NHS的混合液中，EDC和NHS的浓度比为4mM:1mM；g-C3N4QDs的溶液的浓度为1-5mg·mL-1，DNA2溶液的浓度为0.5-3μM。 5.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，第一次搅拌为室温下搅拌15min；第二次搅拌为室温下搅拌1h。 6.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，玻碳电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm。 7.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)混合液中，制备混合液时，三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌，DNA1，g-C3N4QDs的溶液、DNA2溶液的用量比例为4mg：1.6mL：1.6mL：1.6mL，磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.1M，pH为7，Hg2+的浓度为1×10-14～1×10-9mol/L；其中，DNA1的浓度为0.5-3μM，g-C3N4QDs的溶液的浓度为1-5mg·mL-1，DNA2溶液的浓度为0.5-3μM。 8.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，修饰时，混合液的用量为4μL。 9.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，Nafion的质量百分浓度为0.5％，用量为3μL。
所属类别：	发明专利