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原文传递固相萃取与毛细管电泳技术联合分离检测桑叶中多酚类物质的方法

专利名称：	固相萃取与毛细管电泳技术联合分离检测桑叶中多酚类物质的方法
摘要：	本发明涉及一种固相萃取与毛细管电泳技术联合分离检测桑叶中多酚类物质的方法，该方法以甲基丙烯酸丁酯为单体，乙二醇二甲基丙烯酸为交联剂，正丙醇、1,4‑丁二醇作为致孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂，采用热聚合的方式合成了poly（BMA‑co‑EDMA）整体柱，并以该整体柱作为固相萃取柱，与毛细管电泳联用，建立了整体柱固相萃取‑毛细管电泳联用分析桑叶中芦丁、绿原酸、槲皮素的方法。与纯CE法相比，本方法进一步缩短了分析周期（仅需8 min左右），预处理过程操简单。同时，样品基底的除杂完全，也提高了待测样品与相邻杂质峰的分离度，基线平直，具有更宽的线性范围，定量分析也更为准确。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西科技大学
发明人：	冯军;黄文艺;程昊;李利军;孔红星;李彦青;唐婷范;李晓慧
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910405041.1
公开号：	CN110031533A
代理机构：	柳州市荣久专利商标事务所(普通合伙)
代理人：	韦微
分类号：	G01N27/447(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	545006 广西壮族自治区柳州市东环大道268号
主权项：	1.一种固相萃取与毛细管电泳技术联合分离检测桑叶中多酚类物质的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）样品的制备：称取干燥桑叶粉末置于索氏提取器中，用乙醚连续脱脂7～9小时，原料干燥桑叶与乙醚的质量体积比为：1g∶140～160mL，脱脂完成后在室温下冷却使残余的乙醚挥发完全；然后向得到的桑叶粉末中加入甲醇，原料干燥桑叶与甲醇的质量体积比为：1g∶20～40mL，密封超声处理20～40 min后得提取液，连续提取2次后，合并两次提取液，置于旋转蒸发器中挥去甲醇，用体积分数20～30%乙醇定容到规定体积；（2）整体柱的制备：将单体BMA、交联剂EDMA、致孔剂正丙醇和1，4-丁二醇按照质量比为：（17～19）: （11～13）:（52～54）:（16～18）配比，再加入总质量0.5～1.5%wt的引发剂AIBN，在室温下超声15～25 min混合均匀，通氮气10～20 min 除去氧气后得预聚液，用MTMS与体积分数50%γ-MAPS体积比为6:1的混合溶液95～105 μL，对移液枪头内表面进行硅烷化修饰，取预聚液至移液枪头中，两端封口，置于恒温水浴中58～62℃，反应18～22 h；反应结束后得固相萃取整体柱，分别以甲醇和水冲洗固相萃取柱，除去未反应的单体和致孔剂，然后至于恒温干燥箱58～62℃，干燥至恒重，得到poly（BMA-co-EDMA）整体柱；（3）固相萃取：将步骤（2）制备的整体柱安装在5 mL注射器上，用5 mL甲醇，以0.5 mL/min的流速活化poly（BMA-co-EDMA）整体柱，然后取2 mL步骤（1）制备的样品，经滤膜过滤后移至固相萃取柱，用0.5 mL pH 3.0磷酸缓冲液进行预洗脱，再以0.5 mL乙腈作为洗脱液对目标物进行洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，用0.4～0.6mL甲醇溶解，滤膜过滤后取滤液；（4）毛细管电泳分析：采用毛细管电泳法分析步骤（3）得到的滤液中芦丁、绿原酸和槲皮素的含量，毛细管电泳分析的条件是：Agilent高效毛细管电泳熔融石英毛细管，毛细管总长度65 cm，有效长度56 cm，内径75 μm，电泳缓冲溶液为pH 8.5、内加5 mmol/L的十二烷基硫酸钠的15 mmol/L的硼砂溶液，分离高压20 kV，紫外检测波长210 nm。 2.根据权利要求1所述固相萃取与毛细管电泳技术联合分离检测桑叶中多酚类物质的方法，其特征在于：步骤（3）中所述滤膜为0.45 μm滤膜。
所属类别：	发明专利